【Promega】cAMP-Glo™ Assay
实验室用。不可用于医学诊断。Cat.# V1501 的试剂量足够以每孔 60μl 的终体积，在 384孔板中进行 300 次检测。Cat.# V1502 在同样条件下足够进行 3,000 次检测。Cat.# V1503在同样条件下足够进行 30,000 次检测。
说明
cAMP-GIo™ Assay 是一种均质的、利用生物发光原理检测细胞内 CAMP 水平的高通量方法。cAMP-Glo™ Assay 可检测出细胞体内应答 G 蛋白偶联受体(GPCR)上的测试化合物效应而生成的 CAMP。与腺苷酸环化酶偶联的 GPCRS 会升高或降低胞内的CAMP。这种检测方法的原理是:环状 AMP(CAMP)促进蛋白激酶 A(PKA)全酶的活性，降低 ATP，从而引起偶联的萤光素酶(luciferase)反应光信号降低。
cAMP-Glo™Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行用一种测试化合物在一段合适的时间内诱导细胞:诱导后，裂解细胞释放 CAMP，接着加入含有蛋白激酶 A的 CAMP 检测溶液。然后加入 Kinase-Glo® Reagent 终止 PKA 反应，并用萤光素酶反应检测残余 ATP。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用cAMP标准曲线，发光值和 cAMP 的浓度相关联。发光信号的半衰期超过 4小时。信号半衰期的延长使实验用的发光检测仪不再需要带有进样器可以直接进行多个微孔板的批量处理。
特点
●快速，易用
◆检测可在大约 45 分钟内完成。
◆均质。
◆裂解细胞后只需两步。
●信噪比优良
◆在所有的检测 CAMP 的试剂盒中，信号/背景的比率最高。
◆信号/背景的比率 >200(cAMP)，>15(细胞)。
◆体系易于调整为 1536 孔板和更多孔培养板。
●行之有效的发光技术
◆Ultra-Glo™ 重组萤光素酶驱动。
◆无荧光化合物的干扰。
◆无放射性。
储存条件：储存于 -20℃。cAMP 检测液 ( 加蛋白激酶 A 的 cAMP Glo™ Reaction Buffer) 一旦配好则不能冻存。Kinase-Glo® Reagent一旦配好则应分装在小管中储存于 -20℃。有效期见产品标签。
细胞产生cAMP过程和cAMP-GIo™ 检测示意图
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