【Promega】GoTaq® Hot Start Polymerase
GoTaq® Hot Start Polymerase
说明
GoTaq® Hot Start Polymerase (GoTaq® 热启动 DNA 聚合酶 )内含高性能的 GoTaq® DNA 聚合酶,并具有专利抗体与之结合从而阻断其活性。在最初的变性步骤中,当扩增反应体系被加热到 94-95℃ 2 分钟时,聚合酶活性得到恢复。聚合酶活性在低于 70℃时消失或活性最低,实现热启动 PCR。GoTaq® 热启动 DNA 聚合酶具有5' → 3' 核酸外切酶的活性。随同酶一起提供一管 25mM MgCl2,可以优化反应体系中镁离子浓度。同时也提供 5X Green GoTaq® FlexiBuffer 和 5X Colorless GoTaq® Flexi Buffer。这些缓冲液中含有一种能增加样品密度的化合物,使得样品很容易沉进琼脂糖胶加样孔中。
绿色缓冲液含有两种染料 ( 蓝色和黄色 ),在电泳时会分开以监测迁移进度。用绿色缓冲液可在扩增后直接进行电泳分析,而无色的缓冲液用于染料可能会干扰扩增后分析的情形,如荧光或吸光度分析。
GoTaq® Hot Start Master Mixes (GoTaq®热启动混合母液)是预混的、即用的溶液,包含高性能的 GoTaq® Hot Start Polymerase(GoTaq®热启动聚合酶 )、镁离子溶液、dNTP 和缓冲液。在室温下,不到 1分钟的时间里即可被组装、启动;您只需加入模板、水和引物。我们提供绿色或无色的反应缓冲液,也可作为上样缓冲液,可让您实现将PCR 产物从 PCR 仪中取出,直接进行凝胶分析。GoTaq® Hot StartMaster Mixes 中的热启动聚合酶是基于抗体的,可提供更好的特异性和灵敏度,并且方便、易于使用,并节省时间。
特点
• 增加产量,灵敏度和特异性:GoTaq® DNA 聚合酶扩增的强劲性能和高灵敏度已经得到证实,热启动的加入产生更优异的结果。
• 易于使用:反应体系的组装可在室温下完成,无需在冰上操作。
• 高产率:酶激活仅需 2 分钟,确保了酶的最大活性的发挥。
• 特异性更高:非特异扩增和引物二聚体产生的概率降至最低。
• 提高了生产力:从 PCR 直接到凝胶分析。GoTaq® Reaction Buffer 既充当反应缓冲液,又可以用作凝胶上样溶液。
• 方便:反应在一个试管内即可完成,仅需一次加样。使用 master mixes 时,只需要加入模板和引物。
• 最佳设置:根据模板的不同调节反应体系中镁离子的浓度。
储存条件:将所有组分储存于 -20℃。
GoTaq® Hot Start Polymerase 改善了需要热启动的目的片段的扩增。
以 500pg质粒 DNA 为模板,分别用普通 Taq 酶和 GoTaq® Hot Start Polymerase,用 Green或Colorless Flexi Reaction Buffer 扩增一条 1.5kb 需要热启动的 Corynephage omega基因片段。用 GoTaq® Hot Start Polymerase 扩增出一条特异的 1.5kb 目的片段,而用普通 Taq 酶则多扩增出了一条 410bp 的非特异产物。
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