【Miltenyi】纳米级磁珠和微米级磁珠

从您的样本中得到高活性的目的细胞不再是困难的事情。使用美天旎MACS磁分选技术将会大大简化您的实验流程，只需三步即可!

目前，基于纳米级磁珠的细胞磁分选策略主要有两种:有柱式分选和无柱式分选。MACS磁分选技术是利用纳米级超顺磁磁珠的有柱式分选，对此，我们有长期成功的经验。MACS分选柱中会形成高强度的梯度磁场，也只有采用有柱式分选技术才能确保将较少磁性标记的细胞分选出来，得到高活性、活化状态不受影响的目的细胞。

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图1: 磁珠及分选柱的特点。A:采用美天旎有柱式分选技术，从人PBMC中分离得到的单核细胞; B:采用其他厂家无柱式分选技术从相同样本中分选得到的单核细胞。在扫描电镜下可以清楚地看出，使用美天旎有柱式分选技术时，细胞表面没有可见的磁珠标记，细胞膜表面特性也无变化。与此相反，当采用无柱式分选技术时，细胞表面会结合大量的磁珠残留 (箭头所示)，并且此时细胞的形态已发生改变。

置于分选器中时，MACS分选柱中会产生强大的梯度磁场，因此，只需要少量磁珠标记即可完成高效的细胞分选，确保细胞表面剩余足够的抗原表位用于后续实验如荧光染色和流式检测等(图2)。

此外，MACS磁珠标记浓度低、体积小，分选过程中不会激活靶细胞，不影响其分选后的活化状态(图3)。

图2: 从4mL全血中分离得到的CD138+细胞。右上图采用的是美天旎CD138全血磁珠和全血分选柱分选的结果;右下图采用其他厂家的CD138纳米磁珠和无柱式分选。左边的图代表原始的全血样本细胞用CD45、CD19和CD138抗体孵育，然后进行流式检测。结果显示:使用美天旎MACS技术进行有柱式分选得到的细胞在后续的流式检测实验中，才能得到真实可靠的结果。

图3:用美天旎有柱式分选技术和其他厂家无柱式分选技术对人B细胞进行富集后活化状态检测情况比较。将得到的B细胞分别进行直接检测，或分别在含有B细胞刺激因子 (CD40-Ligand/Anti-His 抗体和IL-4) 或不含刺激剂的培养基中培养7天后，用流式检测其表面的活性标记物，CD69、CD80及 CD86。

获得真正untouched细胞

使用MACS磁珠进行阴性分选能够让您获得真正untouched的细胞。正是由于分选柱的存在，将磁场放大，才能保证最少的磁珠标记即足以去除非目的细胞，避免非特异性结合，使目的细胞上完全没有磁珠残留。然而，若使用纳米级无柱式分选技术，则需要加入高浓度的磁珠才足以去除非目的细胞，增加磁珠非特异性结合的几率从而使目的细胞上有磁珠残留的风险(图6)。

图4: 分别使用美天旎MACS Monocyte lsolation Kit llhuman试盒 (A) 以及其他厂家的无柱式磁分选试剂盒 (B)，采用阴选的方法分选单核细胞，随后分别用CD14/CD16抗体 (红色) 以及Dextran抗体 (绿色) 进行染色，在荧光显微镜下观察。结果显示，MACS分选得到的目的细胞非常干净，无磁珠结合:而无柱式分选获得的目的细胞上残留非特异结合的磁珠。

-适用于基础科研和临床应用，最值得信赖的产品

基于分选柱的MACS@磁分选技术为您提供最灵活，最成熟的细胞分选方案

●既可分选常见的细胞类别又可分选稀有细胞

●为基础科研和临床应用提供最成熟的技术支撑

●已有超过35,000例临床细胞应用案例

UltraPure系列磁珠适合所有类型的细胞分离，包括稀有细胞的分离。当初始样本含有较多细胞碎片时，美天旋的UltraPure系列磁珠就能够为您的实验提供令人信服细胞分选结果。

图5:分别使用美天旎UltraPure CD34试剂盒结合有柱式MACS分选技术 (上图)和其他厂家的无柱式CD34磁珠产品 (下图) 同时分选CD34细胞。结果显示，相对于无柱式分选，UltraPure系列磁珠结合分选柱得到的细胞活性更好，细胞碎片更少。

分选目的细胞最快速、最简便的方法

使用美天旎Whole Blood全血磁珠来分选目的细胞，不需要进行红细胞裂解，亦无须进行密度梯度离心步骤。

全血磁珠大大简化了您的实验流程，并且最大限度减少手动操作步骤，从而保证了在最短时间内获得高回收率、高活性的目的细胞。此外，由于省去了离心步骤，操作更安全，尤其是处理未经检测的血样。值得一提的是whole Blood全血磁珠也可以用于骨髓样本中目的细胞的分离。

●分选过程温和，获得的目的细胞得率高、活性好

●操作更安全，尤其对于危险的血液样本

●操作流程简单，节省时间

纯化后的细胞适用于下游实验，包括流式分析、细胞分选、以及体外实验等。

目前美天旎Whole Blood全血磁珠产品可用于CD3+、CD4+、CD8+、CD14+、CD15+、CD19+、CD33+、CD45+、CD56+、CD66b+和CD138+细胞的分选

MACSxpress技术一直接从全血中快速分离目的细胞

MACSxpress®全血分选技术能快速、大规模地从全血中分选目的细胞，并且不需要离心。虽然是微米级磁珠但同样只需少量磁珠标记目的细胞即可，因此不会导致磁珠的非特异性结合以及目的细胞活化(图6)。

MACSxpress®全血分选技术用免疫磁珠标记非目的细胞进而将其去除，获得高纯度的目的细胞。同时，红细胞会因沉降过程而去除，进一步提高目的细胞的纯度

●20分钟内完成全血中目的细胞的分选

●无需离心

●磁珠与细胞结合量少，因此不会活化目的细胞

图6: 用美天旎MACSxpress lsolation Kit和MACSxpress分选器，或用其他厂家的纳米级磁珠进行无柱式细胞分选，从全血中分选中性粒细胞。分选前后的细胞都用CD11b 和CD62L流抗标记，进而进行流式检测，对比可见，MACSxpress 磁珠不会改变细胞的活化状态，而用其它厂家的无柱式分选磁珠分选后会导致中性粒细胞的活化

图7: MACSxpress全血细胞分选技术基本原理