【Miltenyi】MACS®细胞分选(神经科学)
我们独特的细胞分选产品系列采用经过验证的磁性细胞分选技术。不论是小规模的分选细胞还是同时处理多个样本——我们都可提供手动、半自动和自动化解决方案,满足您的特定研究需要。
分离目标神经细胞群体
MACs 磁珠技术
MACS®磁珠技术基于表面抗原进行细胞群体的磁性分选。
●只需1小时即可高效分离神经细胞
●实现活细胞的高效回收,纯度极佳
●用抗lgG/lM或抗生物素/FITC/PE/APC的偶联磁珠进行间接标记,使用您自己的抗体定制细胞分选
阳性分选
采用阳性分选法,将目标细胞进行磁性标记和分选(图4)。该方法采用的神经细胞分离试剂盒包括抗ACSA-2磁珠试剂盒、CD140a (PDGFRa) 磁珠试剂盒(小鼠) 和CD11b (小胶质细胞) 磁珠试剂盒 (人和小鼠)。
图1: 利用MACS技术进行阳性分选。在分选过程中,磁性标记的细胞将保留在分离柱中,未标记的细胞流过分离柱。冲洗步骤后,将分离柱移出分离器磁场,从分离柱上洗脱靶细胞。
阴性分离
当目的细胞缺乏明确的表面标记物,或去除非目的细胞时,可对非目的细胞群进行标记并去除,保留未标记的靶细胞。该方法无需靶细胞标志物,神经元分离试剂盒(小鼠)即使用该方法。
图2:利用MACS技术采用阴性分离的原理磁性标记非靶细胞。在分离过程中,在流经液组分中收集未标记的靶细胞,而非靶细胞则保留在分离柱中。
手动和自动化分选
我们的手动分离器可以快速实现至多8个样本的同时分选。我们的细胞分选仪器——自动化的autoMACS® Pro Separator和半自动的MultiMACS™ Cell24 Separator plus——可提供灵活的工作流程解决方案,获取可重复的结果,且不受用户影响。
快速、简单地分选新生神经细胞
您是否仍在采用历时两周的“摇落”法从新生啮齿动物脑部获取原代神经元? 结合使用我们的MACS®磁珠技术和神经组织解离试剂盒,可在1小时内获取高纯度、高活力的功能神经细胞!
利用神经组织解离试剂盒(NTDK)从新生脑组织 (≤ P7) 中分离细胞
抗ACSA-2磁珠试剂盒(小鼠) 使用美天旎开发的星形胶质细胞特异性单克隆抗体来分选纯的星形胶质细胞(图6)。鉴于ACSA-2表位的木瓜蛋白酶抗性,使用抗ACSA-2磁珠试剂盒 (小鼠)可以从木瓜蛋白酶处理的脑组织获得的细胞悬液中分离星形胶质细胞。而GLAST表位则对木瓜蛋白酶敏感。
因此,抗GLAST(ACSA-1) 磁珠试剂盒 (人、小鼠、大鼠)仅可用于从胰蛋白酶处理的细胞悬液中分离星形胶质细胞。
图3:用抗GLAST(ACSA-1) 磁珠试剂盒(人、小、大鼠)或抗ACSA-2磁珠试剂盒(小鼠)分选新生星形胶质细胞。使用神经组织解离试剂盒(T)(A)或神经组织解离试剂盒(P)(B) 从P3小鼠脑组织中制备单细胞悬液。使用抗GLAST (ACSA-1) 磁珠试剂盒 (人、小鼠、大鼠) (A) 或抗ACSA-2磁珠试剂盒(小鼠) (B) 从单细胞悬液中分选新生星形胶质细胞。用抗GLAST抗体(A) 或抗ACSA-2抗体(B)对细胞进行荧光染色,并在MACSQuant®分析仪上分析。
图4:使用CD140a(PDGFRa) 磁珠试剂盒(小鼠) 从新生小鼠脑部分选少突胶质前体细胞(OPC)。使用神经组织解离试剂盒(P) 从P2小鼠脑部制备单细胞悬液,使用CD140a (PDGFRa)磁珠试剂盒(小鼠)从单细胞悬液中分选OPC。用CD140a抗体对细胞进行荧光染色,并在MACSQuant® 分析仪上分析。
图5:使用神经元分离试剂盒(小鼠)从新生小鼠脑部分离神经元。使用神经组织解离试剂盒(P) 从P1小鼠脑部制备单细胞悬液。用神经元分离试剂盒(小鼠)分离神经元。用非神经细胞抗原特异性抗体对细胞进行荧光染色,并在MACSQuant分析仪上进行流式细胞分析。
仅需半天即可分离成体神经细胞
高纯度高活力的功能性成体神经细胞为全面了解神经生物学和疾病机制以及进行药物筛选分析提供了重要工具。然而,成体神经细胞特别敏感脆弱,紧密粘附于细胞胞体及数以千计的突触以及轴突和树突上。由于由传统方法从成体脑部分离的神经细胞活性较低,目前的原代神经细胞分离和培养一般限于胚胎组织或出生后突触形成前的早期阶段。
从成体脑部(>P7)分离细胞
细胞类型 | 可用产品 |
星形胶质细胞 | Anti-ACSA-2 MicroBead Kit,mouse |
神经元 | Neuron Isolation Kit, mouse |
未成熟的少突胶质细胞 | Anti-04 MicroBeads, human,mouse, rat |
小胶质细胞 | CD11b(Microglia) MicroBeadshuman and mouse |
CD11b/c(Microglia) MicroBeadsrat | |
内皮细胞 | CD45 MicroBeads, mouse |
CD31 MicroBeads, mouse |
图6:用抗ACSA-2磁珠试剂盒 (小鼠)分选成体星形胶质细胞。使用成体脑部解离试剂盒(小鼠和大鼠) 从3个月大的小鼠脑部制备单细胞悬液。用抗ACSA-2磁珠试剂盒(小鼠)分选星形胶质细胞,使用抗ACSA-2抗体对细胞进行荧光染色,并在MACSOuant®分析仪上进行流式细胞分析。
图7:用神经元分离试剂盒(小鼠) 从成体小鼠脑部分离神经元。使用成体脑部解离试剂盒(小鼠和大鼠) 从3个月大的小鼠脑部制备单细胞悬液。然后,用神经元分离试剂盒 (小鼠) 从单细胞悬液中分离成体神经元。使用非神经元标志物和ASCA-2抗原特异性抗体对细胞进行荧光染色,并在MACSQuant分析仪上进行流式细胞分析。
图8:利用MACS技术从人成体组织样本中分选小胶质细胞。从胶质瘤样本中富集人小胶质细胞的纯度可达99%。
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