【Merck】染色质免疫沉淀(ChIP)产品推荐
染色质免疫沉淀(ChIP)
概述
ChIP是一种强有力的用于研究染色体DNA相关蛋白在体内分布的经典技术。这些蛋白可能是组蛋白亚单位及其转译后修饰蛋白或其它染色质相关蛋白,如转录因子、染色质调节因子等。另外,ChIP可用于鉴别与这些蛋白有关的基因组区域。反之,也可用于鉴别与基因组特定区域有关的蛋白。
原理
ChIP技术的原理是在活细胞状态下把细胞内的蛋白质和DNA交联,使用酶切或超声波将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后用目的蛋白特异性抗体免疫沉淀蛋白质-DNA复合物,从而富集目的蛋白结合的DNA片段。
应用
利用ChIP,你可以发现
● 与特定靶蛋白结合的DNA序列
●在指定的细胞条件下,特定蛋白质(如转录因子)在整个基因组上的结合位点和分布
●基因转录和聚合酶活性
●与疾病表型相关的复杂的DNA/蛋白质相互作用
●蛋白质(如组蛋白)的修饰,这可能影响染色质结构和基因表达
●核小体结构和染色体维持的调控
标准方案 VS 快速方案
一个标准的 ChIP 实验通常可以在 2-3 天内完成,但通过替代方案,在 1 天内完成一个完整的 ChIP 实验。快速和标准方案的最大区别在于免疫沉淀所需的时间不同。在针对高丰度靶蛋白使用经过 ChIP 验证的抗体时,建议使用快速方案。而在使用未经验证的抗体或研究低丰度靶蛋白时,使用标准方案。
步骤 | 快速方案(1天) | 标准方案(2-3天) |
交联和收集细胞 | 0.5 小时 | 0.5小时 |
细胞裂解和染色质断裂 | 0.76 小时 | 0.76小时 |
免疫沉淀 | 2 小时 | 过夜 |
洗涤、洗脱、交联逆转 | 3 小时 | 3小时 |
DNA纯化、PCR | 3 小时 | 3小时 |
ChIP 试剂盒为开展 ChIP 实验提供了即用且可靠的方法。在默克生命科学,基于磁珠和琼脂糖珠,我们提供了多种 ChIP 试剂盒。
Description | Catalogue No. |
Magna ChIP™ A Kit | 17-610 |
Magna ChIP™ G Kit | 17-611 |
EZ-Magna ChIP™ A Kit | 17-408 |
EZ-Magna ChIP™ G Kit | 17-409 |
Magna ChIP™ A/G Kit | 17-10085 |
EZ-Magna ChIP™ A/G Kit | 17-10086 |
Magna ChIP™ HT96 Kit | 17-10077 |
EZ-Magna ChIP™ HT96 Kit | 17-10078 |
Magna ChIP-Seq™ Chromatin Immunoprecipitation and Next Generation Sequencing Library Preparation Kit | 17-1010 |
Magna ChIP 2 ™ Universal Chromatin Immunoprecipitation DNA Microarray Kit | 17-1000 |
Magna ChIP 2 ™ Universal Chromatin Immunoprecipitation DNA Microarray Quad Kit | 17-1004 |
Magna ChIP™ G Tissue Kit | 17-20000 |
Magna ChIP™ Protein A+G Magnetic Beads | 16-663 |
Magna ChIP™ Protein G Magnetic Beads | 16-662 |
Magna ChIP™ Protein A Magnetic Beads | 16-661 |
ChIP Assay Kit (Agarose) | 17-295 |
EZ-ChIP™ Kit (Agarose) | 17-371 |
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