【Merck】整套蛋白质印迹解决方案

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Merck IEVH00005 IPVH00005 ISEQ00005 IPFL00005 IPVH00010 ISEQ00010 IPFL00010 HATF00010 IEVH85R IPVH85R ISEQ85R IPFL85R Immobilon-E Immobilon-P Immobilon-PSQ Immobilon-FL Immobilon NC 2500 2502 2504 70955 407207 WBAVDCH01 WBAVDFL01 WBAVDP001 WBKLS0050 WBKLS

Immobilon® PVDF转印膜

默克生命科学旗下Millipore的Immobilon®系列转印膜，数十年来支持了核酸和蛋白印迹技术的广泛应用，有数以万计的文献引用。

• 1975年Millipore NC（硝酸纤维素）膜成为Southern Blot方法建立的基础

• 1985年推出PVDF膜（聚偏二氟乙烯，Immobilon®-P）以替代NC膜，显著改善Western Blot检测效果

• 1988年上市Immobilon®-PSQ，使小分子量蛋白/肽转印效果大幅提高

• 2005年因应荧光检测的发展，Immobilon®-FL低荧光背景膜上市，弥补了NC膜和普通PVDF膜在荧光检测中的不足

• 2018年颠覆高载量PVDF膜必须以甲醇预润湿的技术限制，即用型Immobilon®-E PVDF转印膜开创了Western Blot的新时代

PVDF膜作为Western Blot转印膜的主要优点：

• 载量高：蛋白吸附能力强，结合稳固，保证低丰度蛋白也能成功检测

• 物化性能稳定：延展性好且化学兼容性好，不像纯硝化纤维那样易翘易脆裂，可长时间存放，

• 多种品种供选择更方便做多轮杂交：可以根据蛋白的分子量、丰度和后续的检测方法（如化学发光或荧光）选择最合适的膜

Immobilon®转印膜全系列产品选择指南

-	-	即用型PVDF转印膜	PVDF转印膜	小孔径PVDF转印膜	低荧光背景PVDF转印膜	NC膜
产品类别	-	Immobilon-E	Immobilon-P	Immobilon-PSQ	Immobilon-FL	Immobilon NC
-	26.5cm x 1.87m小规格卷膜	IEVH00005	IPVH00005	ISEQ00005	IPFL00005	-
-	26.5cm x 3.75m HATF00010标准规格卷膜	-	IPVH00010	ISEQ00010	IPFL00010	HATF00010 33cm x 3m
尺寸*/目录号	8.5cm x 10m卷筒膜	IEVH85R	IPVH85R	ISEQ85R	IPFL85R	-
孔径	-	0.45um	0.45um	0.2um	0.45um	0.45um
载量	-	胰岛素：160μg/cm² BSA: 215μg/cm² 山羊IgG: 294μg/cm²		胰岛素:262ug/cm²BSA: 340ug/cm²山羊IgG: 448ug/cm²	胰岛素:155ug/cm²BSA: 205ug/cm²山羊IgG: 300pg/cm²	胰岛素:117pg/cm²BSA: 160pg/cm²山羊IgG: 259ug/cm
检测方法	-	化学发光，显色，放射		化学发光	化学发光，荧光	化学发光，荧光
主要特点/应用	-	市售产品中唯一不需要甲醇预润湿的PVDF转印膜。提供卷筒膜和卷膜两种形式	经典PVDF 转印膜，载量高，耐受多次检测。新推出小尺寸和卷筒膜格式	<20kDa蛋白/多肽专用PVDF膜，载量最高，提高低丰度蛋白检测成功率。新推出小尺寸和卷筒膜格式	低荧光背景PVDF膜，较NC膜荧光背景更低而载量更高。新推出小尺寸和卷筒膜格式	传统核酸和蛋白印迹膜，蛋白载量低于PVDF膜

封闭剂/信号增强试剂

封闭膜上未转印蛋白的区域，可以阻止抗体结合上去形成背景信号。与常用的脱脂奶或BSA蛋白类封闭剂相比，新型的小分子化学封闭剂封闭更均匀，信噪比更佳。而同时作为封闭剂和抗体稀释液使用的免疫信号增强试剂更是整体提高了WB的方便性和成功率。

牛奶在膜上形成厚厚的一层蛋白，与抗体的非特异性结合导致整体高背景（上）。

Bløk®封闭剂仅在膜上形成很薄的一层化学分子层，不会与抗体结合（下），背景较低，也更节约抗体。

有效降低背景Immobilon® BlØk小分子封闭

●改善信噪比·减少抗体非特性性结合，显著降低背景

●使用方便:即用型，空温可存放2年以上

●多样化选择: 分为常规型、荧光检测型和磷酸化检测型

产品名称	检测方法	规格	目录号
BlØk-CH Reagent	检测方法化学发光检测	500ML	WBAVDCH01
BlØk@-FL Reagent	荧光检测	500ML	WBAVDFL01
BlØk-PO Reagent	磷酸化蛋白检测	250ML	WBAVDP001
5% Alkali-soluble Casein	通用	250ML	70955

低丰度蛋白检测，节约抗体Immobilon® 免疫信号增强试剂

Immobilon®免疫信号增强剂是一种即用型试剂，兼具信号放大和封闭功能，可通过增强抗体抗原特异性结合反应，获得更强的信号。

• 增强信号：比传统试剂强2-10倍，显著提高低丰度蛋白的检测成功率

•兼容性好：适合PVDF膜和NC膜，也不限制染色和检测方法（显色/化学发光/荧光）

• 节约抗体：在保证信号的同时，大幅减少抗体的用量

产品名称	特点	规格	目录号
Immobilon Signal Enhancer for Immunodetection	单瓶装，用作封闭剂/一抗、二抗稀释液，大幅增加低丰度蛋白检测成功率，节省抗体	500mL	WBSH0500
SignalBoost™ Immunoreaction Enhancer Kit	度蛋白检测成功率，节省抗体200mL，大幅增加低丰度蛋白检测成功率，节省抗体	400mL	407207

Immobilon® HRP底物

默克生命科学Immobilon®系列HRP化学发光底物来自Millipore，根据灵敏度和操作方便性要求，提供众多种类和规格。选择一款适合的Immobilon® HRP化学发光底物，能在获得最佳信噪比的同时帮您节约更多宝贵的抗体。

Immobilon® HRP底物全系列产品选择指南

产品名称	Immobilon® classico	Immobilon® crescendo	Immobilon®forte	Immobilon®	Immobilon®ECL Ultra
大致灵敏度下限	～6pg	～1-3pg	～400fg	～400fg	低fg
产品形式	预混单瓶装	预混单瓶装	预混单瓶装	两瓶装	两瓶装
信号持续时间	1小时	3小时	3小时	3小时	5小时
产品有效期	4 °C，1年	4 °C，1年	常温，1年	4 °C，1年	4 °C，1年
工作液有效期	4 °C，1年	4 °C，1年	常温，1年	4 °C，7天	4 °C，30天
推荐目录号和规格	WBLUC002020mL	WBLUR002020mL	WBLUF002020mL	WBKLS005050mL	-
	WBLUC0100100mL	WBLUR0100100mL	WBLUF0100100mL	WBKLS0100100mL	WBULS0100100mL
	WBLUC0500500mL	WBLUR0500500mL	WBLUF0500500mL	WBKLS0500500mL	WBULS0500500mL
突出特点	• 即用型单瓶装，超方便• 20mL小包装，适合偶尔进行WB检测或选择底物的早期评估• 三个级别，根据目的蛋白不同丰度选择合适的灵敏度			• 高敏及超敏，低丰度蛋白成功检测的保证• 超级性价比• 节约宝贵抗体

ReBlotTM抗体剥离试剂

在同一块转印膜上检测多个分子量相近的蛋白，抗体剥离试剂可以有效去除膜上的免疫信号，第二轮实验可直接在原来的转印膜上进行而不必重新跑胶和转膜，节约样本，提高了数据的可比性。另一方面，如果首次检测没有获得最优数据，需要对一抗/二抗浓度进行调整，也可以用该试剂进行处理，加速实验进程。

方便有效的抗体剥离试剂 ReBlot™ Plus 再杂交试剂

• 优化配方：无酸成分，减少蛋白降解（如Edman降解）风险

•通用性好：硝酸纤维素膜和PVDF膜均可使用

•使用安全：不含β-巯基乙醇，无难闻气味

•操作方便：仅需15min常温处理

•两种选择：根据情况选择温和型和加强型，以期达到最佳效果

ReBlot™有效去除杂交信号，方便多次抗体检测

两倍稀释的 A431 细胞裂解液经 SDS-PAGE 电泳分离并转印到Immobilon®-P 膜上，孵育 HSP70 抗体 (1:8,000，目录号MAB374，上 )，采用 ReBlot™ Plus 加强型试剂剥离处理 15 min（中），再与 anti-actin 抗体反应（1:8,000，目录号 MAB1501，下 )。ReBlot™剥离抗体非常有效，继而获得了非常理想的 actin 印迹检测结果；即使两种一抗共用同一种抗小鼠二抗，效果依然令人满意。

产品名称	规格	目录号
ReBlot Plus Western Blot Recycling Kit	1kit	2500
ReBlot Plus Mild Soulution	50ml	2502
ReBlot Plus Strong Solution	50ml	2504