【Merck】蛋白质生物活性的保持

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Merck 04693132001 P8340 04906845001 04906837001 P8340 P9599 P8215 P8465 P1860 S8820 P2714 I3911 4693116001 4693124001 11697498001 11836145001 11836153001 5892970001 6538304001 5892988001 S8830 P8849 I3786 4693132001 5056489001 11873580001 4693159001 58927

蛋白质是一种极具多相性的生物大分子，离开其天然环境，蛋白质分子极不稳定，在细胞中和抽提液中蛋白质的性状也不尽相同。蛋白质的提取是开展蛋白研究的第一步，提取有生物活性的完整蛋白是下游实验成功的基础。

从细胞中提取蛋白质时，也会释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速被抑制以保持蛋白质不被降解。因此，在蛋白质提取过程中，

需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解；如果是研究磷酸化蛋白，需要加入磷酸酶抑制剂，从而获得蛋白高产和真实、可重现的功能分析数据。

由于各种蛋白酶对不同蛋白酶抑制剂的敏感性各不相同，通常使用几种蛋白酶抑制剂的混合物确保有效抑制。商品化的抑制剂混合物使用方便，抑制效果快且稳定。

下面介绍几款经典的蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物药片和浓缩液产品及使用方法，帮助您制备高品质蛋白样品。

不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物

货号	04693132001
品牌	Roche
特点	只需将速溶片从简易箔包装推出并加入缓冲液中即可。 • 完善的保护：立即保护您的蛋白质免受广泛的蛋白酶的降解。 • 灵活性：几乎能够保护任何组织或细胞提取物中的蛋白质，包括动物、植物、酵母、细菌或真菌。 • 安全性：选择对您或您周围的人没有任何风险的无毒抑制剂。 • 适用于IMAC纯化：使用cOmplete组氨酸标记纯化树脂，纯化含多组氨酸标签的蛋白质。

操作指南

1.取用

用拇指根部（而不是指甲）小心将片剂从箔泡包装中挤出以防止片剂断裂。

2.储存液（25x浓度）的配制

将一片cOmplete无EDTA片剂溶解于2ml双蒸水或100mM pH 7.0磷酸盐缓冲液中。

3.工作液制备

一片cOmplete无EDTA片剂足够用于50ml抽提溶液中蛋白酶活性的抑制。如果存在极高的蛋白酶活性，一片应该也能用于25ml的抽提液。片剂可直接加入至抽提液中。储存在+2到+8°C。

tips:如需在更小的体积中进行蛋白酶活性抑制，我们推荐使用cOmplete无EDTA片剂Mini版（1片用于10 ml抽提液)

蛋白酶抑制剂浓缩液

货号	P8340
品牌	Sigma-Aldrich
特点	DMSO浓缩液，抑制效果全面，使用时1:100稀释，经济而不浪费，引用文献众多。

操作指南

按需要量吸取适当体积的抑制剂混合液加到样品中，充分混匀。

每ml混合液推荐用于来自20g（湿重）牛肝的100ml裂解物或来自从密度为108细胞/mL的CHO细胞获取的10ml细胞裂解物中的内源性酶进行抑制。

tips：注意：并非所有的裂解物中都含有等量的内源性酶，需要对所需的混合液体积进行调整。

PhosSTOP™磷酸酶抑制剂

货号	04906845001，04906837001
品牌	Roche
特点	• 全面的保护：抑制酸性及碱性磷酸酶，以及丝氨酸/苏氨酸（PP1、PP2A和PP2B）和酪氨酸蛋白磷酸酶。 • 安全：在水相溶液中溶解无毒性的PhosSTOP片剂，避免了有机溶剂（如DMSO） • 适用于福尔马林固定：维持组织切片中蛋白的磷酸化状态。 • 便捷：免去了寻找合适的磷酸酶抑制剂的耗时步骤。 • 易用：只需将速溶片加入到您的缓冲液中即可。 • 稳定：可将储备溶液储存在+2至+8°C一个月，或在-15至-25°C至少6个月。

操作指南

1.10x浓缩储存液的制备

将一片PhosSTOP片剂置于1ml水或缓冲液中，通过搅拌使其溶解。该储存液可在+2至+8°C稳定超过1个月，或在-15至-25°C稳定至少6个月。

2.工作液的制备

一片片剂可用于10ml抽提液的中磷酸化酶活性的抑制。必要时同样体积的溶液中可加入2片。

tips：

• PhosSTOP

片剂可与蛋白酶抑制剂混合片剂一同使用，防止蛋白发生去磷酸化和蛋白酶降解。

• 尽管该片剂无毒性，但它们依然有害，并需做相应处理。请勿食用或吞服。小心将片剂从箔泡中挤出。切勿使用指甲，以免将片剂弄碎。

蛋白酶抑制剂混合物

产品描述	目录号	产品形式/包装规格	抑制蛋白酶种类	工作液配制
Protease Inhibitor Cocktail	P8340	1mL 或 5mL 血清瓶装DMSO 浓缩液	丝、半、天、氨	1:100
Protease Inhibitor Cocktail	P9599	1mL 或 5mL 血清瓶装DMSO 浓缩液	丝、半、天、金、氨	1:100
Protease Inhibitor Cocktail,DMSO	P8215	1mL 或 5mL 血清瓶装DMSO 浓缩液	丝、半、天、金	20g 酵母 /mL
Protease Inhibitor Cocktail,powder	P8465	冻干粉，可配制 5mL 或25mL DMSO 水溶液	丝、半、天、金、氨	母液按 1:20稀释
Protease Inhibitor Cocktail,DMSO	P1860	1mL DMSO 浓缩液	丝、半、天、氨	1:200
SIGMAFAST™ Protease Inhibitor Tablets	S8820	2 片或 20 片铝箔装	丝、半、天、金	1:100
Protease Inhibitor Cocktail	P2714	冻干粉血清瓶装	丝、半、天、金	100mL 水溶液 / 瓶
Protease Inhibitor Cocktail, Animal Component Free	I3911	冻干粉，1 瓶或 5 瓶	丝、半、天、金	100mL 水溶液 / 瓶
cOmplete™ Protease Inhibitor Cocktail	4693116001	20 片铝箔装	丝、半、天	1:50
cOmplete™, Mini Protease Inhibitor Cocktail	4693124001	30 mini 片铝箔装	丝、半、天	1:10
cOmplete™ Tablets	11697498001	20 片玻璃瓶装	丝、半、金	1:50
cOmplete™ Tablets	11836145001	3x20 片玻璃瓶装	丝、半、金	1:50
cOmplete™ Tablets, mini, glass vials	11836153001	25 mini 片玻璃瓶装	丝、半、金	1:10
cOmplete™ ULTRA Tablets, Mini, EASYpack	5892970001	30 mini片铝箔装	丝、半、金	1:10
cOmplete™ ULTRA Tablets, glass vials	6538304001	2x10 片玻璃瓶装	丝、半、天、金	1:50
cOmplete™ ULTRA Tablets, glass vials	5892988001	6x10 片玻璃瓶装	丝、半、天、金	1:50

缩写注释：丝：丝氨酸蛋白酶；半：半胱氨酸蛋白酶；天：天冬氨酸蛋白酶；氨：氨肽酶；金：金属蛋白酶；嗜：嗜热菌蛋白酶

* 对胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，蛋白酶 K 强效抑制

蛋白酶抑制剂混合物，EDTA free，用于His标签蛋白纯化等IMAC

产品描述	目录号	产品形式/包装规格	抑制蛋白酶种类	工作液配制
SIGMAFAST™ Protease Inhibitor Cocktail Tablets, EDTA-Free	S8830	2 片或 20 片铝箔装	丝、半、天、金	1:100
Protease Inhibitor Cocktail,DMSO	P8849	1mL或5mL 玻璃装DMSO 浓缩液	丝、半、天、嗜、氨	1:100
Protease Inhibitor Cocktail, Animal Component Free	I3786	1mL或5mL DMSO 浓缩液	丝、半、天、氨	1:100
cOmplete™ Tablets, EDTA-free, EASYpack	4693132001	20 片铝箔装	丝、半	1:50
cOmplete™ Tablets, EDTA-free, glass vials	5056489001	3x20 片玻璃瓶装	丝、半	1:50
cOmplete™ Tablets, EDTA-free, glass vials	11873580001	20 片玻璃瓶装	丝、半	1:50
cOmplete™ Tablets, mini, EDTA-free, EASYpack	4693159001	30 mini 片铝箔装	丝、半	1:10
cOmplete™ ULTRA Tablets, Mini, EDTA-free, EASYpack	5892791001	30 mini 片铝箔装	丝、半、天*	1:10
cOmplete™ Tablets, mini, EDTA-free, glass vials	11836170001	25 mini 片玻璃瓶装	丝、半	1:10
cOmplete™ ULTRA Tablets, EDTA-free, glass vials	5892953001	2x10 片玻璃瓶装	丝、半、天*	1:50
cOmplete™ ULTRA Tablets, EDTA-free, glass vials	6538282001	6x10 片玻璃瓶装	丝、半、天*	1:50
Protease Inhibitor Cocktail Set III, EDTA-Free	539134	1mL、5mL或 10mL DMSO浓缩液	丝、半、天、氨	1:100~2000

缩写注释：丝：丝氨酸蛋白酶；半：半胱氨酸蛋白酶；天：天冬氨酸蛋白酶；氨：氨肽酶；金：金属蛋白酶；嗜：嗜热菌蛋白酶

* 对胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，蛋白酶 K 强效抑制

裂解液和蛋白酶抑制剂混合物

产品描述	产品形式/包装规格	目录号
cOmplete™ Lysis-B (2x) EDTA-free	100ml裂解液/20片，10分钟完成裂解	4719948001
cOmplete™ Lysis-M	200ml裂解液/20片，10分钟完成裂解	4719956001
cOmplete™ Lysis-M EDTA-free	200ml裂解液/20片，10分钟完成裂解	4719964001

磷酸酶抑制剂混合物

产品描述	抑制蛋白酶种类	产品形式/包装规格	工作液配制	目录号
PhosSTOP™	酸、碱、酪、丝、苏	20 片铝箔装	1:10	4906837001
PhosSTOP™	酸、碱、酪、丝、苏	10 片铝箔装	1:10	4906845001
Phosphatase Inhibitor Cocktail 2	酸、碱、酪	1mL或 5mL浓缩水溶液	1:100	P5726
Phosphatase Inhibitor Cocktail 3	丝、苏、碱性磷酸异构酶	1mL或5mLDMSO 浓缩液	1:100	P0044
Phosphatase Inhibitor Cocktail Set II	酸、碱、酪	5x1mL 浓缩水溶液	1:100	524625

缩写注释：酸：酸性磷酸酶；碱：碱性磷酸酶；酪：酪氨酸蛋白磷酸酶、丝：丝氨酸蛋白磷酸酶；苏：苏氨酸蛋白磷酸酶

蛋白酶抑制剂/磷酸酶抑制剂混合物（质谱样品专用）

产品描述	抑制蛋白酶种类	产品形式/包装规格	工作液配制	目录号
MS-SAFE Protease and Phosphatase Inhibitor	同时抑制蛋白酶及磷酸酶	干粉，1 瓶或 5 瓶	20mL 水溶液 / 瓶	MSSAFE