【Corning】354234 产品使用说明
Corning® Matrigel® Basement Membrane Matrix, LDEV-free
（354234）
Corning Matrigel基质是从Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）小鼠肉瘤中提取的可溶化基底膜制备物，该肉瘤富含细胞外基质（ECM）蛋白质，包括Laminin（主要组分）、Collagen IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、接触素/基底膜黏连蛋白和一些生长因子。
应用：
表 1 354234产品信息
溶解方法
将Corning Matrigel®基底膜基质解冻的方法是将试管浸入冰中，放置在4°C过夜。一旦Corning Matrigel基底膜基质解冻，应轻轻摇晃试管以确保物质均匀分散。始终保持Corning Matrigel基质在冰上。请使用无菌技术操作。将解冻的Corning Matrigel基底膜基质试管放置在无菌区域，喷洒70%乙醇于试管盖上，并风干。
可以使用预冷的移液管轻轻吸取CorningMatrigel基底膜基质以确保均匀性。将Corning Matrigel基底膜基质分装到管中，当Corning Matrigel基底膜基质堵塞移液枪头端或导致移液管测量不准确时，更换移液管头。如果将凝胶状的Corning Matrigel基底膜基质放置在4°C的冰上24~48小时，可以重新溶解成液态。
Corning Matrigel基底膜基质可以作为薄凝胶层（0.5 mm），在其上培养细胞。细胞也可以在Corning Matrigel基底膜基质内培养，使用1 mm的层厚。过度稀释会产生薄的非凝胶蛋白层，这对于细胞附着可能有用，但在分化研究中可能不太有效。
涂层步骤
Corning Matrigel基底膜基质可以用于多种方式。薄凝胶法适用于在凝胶上方培养细胞，厚凝胶法允许在三维基质中培养细胞，而薄涂层法（无凝胶）则提供了一个复杂的蛋白层，供您在其上培养细胞。根据您希望实现的最终结果，无论是细胞生长、附着还是分化，选择相应的方法。
注意：Corning Matrigel基质产品的蛋白质浓度是每批次具体的，并在分析证书上提供。为了获得一致的结果，通过计算所需的特定蛋白质浓度（mg/mL）稀释Corning Matrigel基质产品。为保持凝胶一致性，不建议将Corning Matrigel基质稀释至低于3 mg/mL。使用冰冷的无血清培养基稀释Corning Matrigel基质。通过上下移液或在冰中摇晃试管来混合。
薄凝胶法：
●根据推荐方法解冻Corning Matrigel基底膜基质。使用预冷的移液器，将Corning Matrigel基底膜基质混合均匀。
●保持培养板在冰上，每平方厘米生长表面上加入50 µl的Corning Matrigel基底膜基质。
●将培养板放置在37°C的环境中，静置30分钟。
●如有必要，在使用之前将未结合的物质吸取，并使用无血清培养基轻轻漂洗（确保移液器的尖端不刮伤涂层表）便可使用。
厚凝胶法：
●根据推荐方法解冻Corning Matrigel基底膜基质。使用预冷的移液器，将Corning Matrigel基底膜基质混合均匀。
●将培养板放置在冰上。将细胞加入Corning Matrigel基底膜基质中，并使用预冷的移液器悬浮。每平方厘米生长表面上加入150-200 µl的Corning Matrigel基底膜基质。
●将培养板放置在37°C的环境中，静置30分钟。现在可以添加培养基。细胞也可以在这个凝胶上方培养。
薄涂层法：
●根据推荐方法解冻Corning Matrigel基底膜基质。使用预冷的移液器，将Corning Matrigel基底膜基质混合均匀。
●使用无血清培养基将Corning Matrigel基底膜基质稀释到所需浓度。需要进行经验研究以确定适用于您应用的最佳涂层浓度。
●将稀释后的Corning Matrigel基底膜基质添加到待涂层的容器中。数量应足以轻松覆盖整个生长表面。在室温下孵育一小时。
●吸去未结合的物质，并使用无血清培养基轻轻漂洗后便可使用培养板。
细胞回收
使用Corning细胞回收溶液（Cat 354253）可以在冰上7小时内降解Corning Matrigel基底膜基质，从而实现对生长在上面的细胞的最高效回收，或者使用Corning Dispase（Cat 354235），这是一种金属酶，能够轻柔释放细胞，实现连续培养。
其他细胞品类
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