【Corning】354236 产品使用说明

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Corning 细胞外基质 ECM 生物涂层 Biological Coatings Matrigel Matrix Cell-Tak 细胞和组织粘附剂产品胶原蛋白 Collagen 层粘连蛋白 Laminin PuraMatrix BioCoat Poly-D-Lysine Fibronectin Synthemax vitronectin substrate 354236

Corning® Collagen I, Rat Tail

（354236）

Corning® Collagen I, Rat Tail可用作组织培养表面上的薄层，以增强细胞的附着和增殖，也可用作凝胶来促进细胞特定形态和功能的表达。

表 1 354236产品信息

包被过程

Corning大鼠尾胶原蛋白I可以在玻片和组织培养皿上凝胶化，或者作为薄层包被用于细胞附着。细胞可以培养在凝胶的顶部、凝胶的内部或凝胶层之间。

薄层包被过程：

1) 推荐使用5 μg/cm²的密度进行薄层包被。使用0.02 N乙酸将材料稀释至50 μg/mL。Corning大鼠尾胶原蛋白I在中性pH条件不发生溶解。

2) 以5 μg/cm²的密度向包被的培养皿中加入足够的稀释后的Corning大鼠尾胶原蛋白I。例如：35 mm培养皿的表面积大约是10 cm²。1到2 mL的上述溶液将足够覆盖培养皿。

3) 室温下孵育1小时后小心地吸去残余的溶液。

4) 使用PBS或无血清培养基清洗每孔以除去酸。培养板可以立即使用或在2-8℃无菌条件储存备用（1周以内）。

凝胶过程：

1) 当pH为碱性时，Corning大鼠尾胶原蛋白I将会凝胶化。通过给150 mm有盖培养皿的盖子缠绕2英寸无菌海绵纱布来准备氨蒸汽小室。使用氢氧化铵浸透纱布。将盖子放置在150 mm培养皿上并储存起来。

2) Corning大鼠尾胶原蛋白I均匀地包被需要包被的表面。根据需要调整包被的厚度。50~100 μl的Corning大鼠尾胶原蛋白I足够包被1个22 mm的盖玻片。对于100 mm直径的培养皿，每个培养皿大约需要加入6.0 mL；对于60 mm直径的培养皿，每个培养皿大约需要加入3.2 mL；对于35 mm直径的培养皿，每个培养皿大约需要加入1.0 mL。

3) 将包被的玻片或培养皿移入氨蒸汽小室中并暴露3分钟。

4) 加入无菌ddH₂O，使其覆盖包被的玻片或培养皿30分钟（35 mm培养皿使用5 mL无菌水，60 mm培养皿使用10 mL无菌水）。吸出并更换0.5-1.0 mL的无菌ddH₂O，盖上盖子将其放置在超净工作台中过夜。

5) 吸出无菌ddH₂O使用，储存在2-8°C。

Corning大鼠尾胶原蛋白I的代替凝胶程序

1) 将下列物品放置在冰上：Corning大鼠尾胶原蛋白I、无菌10X PBS、无菌ddH₂O、无菌1 N NaOH。

2) 确定使用的Corning大鼠尾胶原蛋白I溶液的终体积和需要的终浓度。

3) 在冰上放置足够量的无菌管，以装载Corning大鼠尾胶原蛋白I溶液。

4) 在生物安全柜中进行以下操作：

① 向管中加入下列体积的10X PBS：

② 计算Corning大鼠尾胶原蛋白I的使用体积（到步骤⑥再加入管中）：

③ 向10X PBS中加入如下体积的无菌预冷的1 N NaOH：

(加入的胶原蛋白体积)×0.023 mL = 1 N NaOH的体积