【Corning】354277 产品使用方法

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Corning 细胞外基质 ECM 生物涂层 Biological Coatings Matrigel Matrix Cell-Tak 细胞和组织粘附剂产品胶原蛋白 Collagen 层粘连蛋白 Laminin PuraMatrix BioCoat Poly-D-Lysine Fibronectin Synthemax vitronectin substrate 354277

Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix, LDEV-free

（354277）

基底膜是连续的特殊细胞外基质片层，存在于真皮表皮交界处，在消化道、呼吸道、生殖道和泌尿道的所有腔上皮基底部，并且位于内分泌和外分泌腺体的实质下面。

Corning Matrigel hESC-qualified Matrix是Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）肿瘤的可溶性基底膜提取物，在室温下凝胶化，形成真正的再生基底膜。主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、接合蛋白和肝素硫酸酯蛋白聚糖。此外，还包括生长因子、胶原酶、纤溶酶原激活物和其他未定义的成分。

人类胚胎干细胞（hES细胞）的获取和培养技术使用了血清和/或小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）饲养层。对于hES细胞研究而言，理想的环境包括专门适用于hES细胞的细胞培养表面和无血清的定义培养基。Corning Matrigel hESC-qualified Matrix和STEMCELL Technologies的mTeSR™1（在WiCell研究所授权下开发）是一种高质量的表面和培养基组合，可为hES细胞的无饲养层扩增提供第一个完整的环境。

Corning Matrigel hESC-qualified Matrix是干细胞研究的优化表面。已经通过STEMCELL Technologies的mTeSR1兼容性鉴定，省去了耗时的筛选过程，同时提供了对hES细胞研究至关重要的重复性和一致性。将Corning Matrigel hESC-qualified Matrix与各种培养基结合使用时，被广泛接受作为hES细胞和人类诱导多能干细胞（iPS细胞）的替代基质。mTeSR1配方是定义的无血清培养基，设计用于与Corning Matrigel hESC-qualified Matrix作为底物一起扩增hES细胞和维持其未分化状态。它不需要任何进一步添加生长因子或补充物。mTeSR1配方和Corning Matrigel hESC-qualified Matrix已被证明是培养不同hES细胞系的成功组合，可维持多达20个传代。在mTeSR1中维持的细胞表达高水平的多能性标记物，如Oct-3/4和SSEA-3，并且通过胚瘤实验的三个胚层分化能力也证明了mTeSR1能维持细胞的多能性。

表 1 354277 产品信息

溶解方法

与Corning Matrigel hESC-qualified Matrix接触的所有培养器皿或培养基都应事先冷却/冰冷，因为Corning Matrigel hESC合格基质在10°C以上开始凝胶化。

将Corning Matrigel hESC合格基质解冻时，将小瓶完全浸入冰中并放入4°C冰箱的后部，过夜。Corning Matrigel hESC-qualified Matrix解冻，轻轻摇晃瓶子，确保物质均匀分散。喷洒瓶盖上的70%乙醇并风干。保持产品冰上，并使用无菌技术处理。将物质分装到预冷的管中的适当分装物中，当Corning Matrigel hESC-qualified Matrix堵塞尖端和/或导致移液管测量不准确时，请立即更换吸头并立即重新冷冻。如需将凝胶化的Corning Matrigel hESC-qualified Matrix重新液化，可将其放置在4°C冰中冰浴24-48小时。

使用方法

根据蛋白质浓度，为每个批次计算稀释倍数。要与STEMCELL Technologies的mTeSR™1培养基一起使用，请根据分析证书上提供的稀释倍数准备分装物。分装物的体积通常在270-350 µL之间。

将一份Corning Matrigel hESC-qualified Matrix分装物加入25 mL DMEM/F-12中，涂覆四个6孔板（每孔1 mL）或三个100 mm培养皿（每个培养皿8 mL）。在使用前，将培养器皿在室温（15-25ºC）下孵育至少1小时。在使用前，将剩余的液体吸走（确保移液管的尖端不会刮伤涂层表面）便可使用。

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