【Corning】356237 产品使用方法

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Corning 细胞外基质 ECM 生物涂层 Biological Coatings Matrigel Matrix Cell-Tak 细胞和组织粘附剂产品胶原蛋白 Collagen 层粘连蛋白 Laminin PuraMatrix BioCoat Poly-D-Lysine Fibronectin Synthemax vitronectin substrate 356237

Corning® Matrigel® Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free, LDEV-free

（356237）

基底膜是体内细胞下方的薄的细胞外基质。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free是从Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）小鼠肉瘤中提取的可溶化基底膜制备物，该肿瘤富含细胞外基质蛋白。其主要成分是层粘连素，其次是IV型胶原蛋白、肝素硫酸酯蛋白聚糖、接触素/网蛋白。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free还含有TGF-β、表皮生长因子、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活剂等在EHS肿瘤中自然存在的生长因子。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free对于正常和转化的依赖锚定的上皮样和其他细胞类型的附着和分化都是有效的。这些细胞类型包括神经元、肝细胞、Sertoli细胞、鸡晶状体和血管内皮细胞。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free将影响成年大鼠肝细胞、血管内皮细胞以及小鼠和人类乳腺上皮细胞的基因表达，还可用于小鼠和人类乳腺上皮细胞的三维培养。它是几种肿瘤细胞侵袭试验的基础，支持体内外周神经再生，并提供研究体外和体内血管生成所需的基质。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free还支持体内免疫抑制小鼠中人类肿瘤的增殖。Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free可用于移植未分选的乳腺细胞，以及嵌入在Corning Matrigel中的分选上皮亚群。该基质还被用作癌症干细胞模型，并显示在体内增强肿瘤生长速率。

表 1 356237 产品信息

溶解方法

Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free和所有与之接触的培养器皿或培养基都必须预先冷藏/冷冻，因为Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free在10°C以上会开始凝胶。始终将Corning Matrigel Matrix保持在冰上。

将Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free冻存瓶浸入4°C冰箱的冰中，放在后部过夜进行解冻。一旦解冻，旋转瓶子以确保物质均匀分散。始终保持Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free在冰上。使用无菌技术处理。将解冻的Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free瓶放置在无菌区域，用70%乙醇喷洒瓶盖，并晾干。

可以使用预冷的移液管轻轻地吸取Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free，以确保均匀性。将Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free分装到管中，每当基质堵塞移液枪头端和/或导致移液管测量不准确时，更换移液管头。如果将凝胶化的Corning Matrigel Matrix Phenol Red Free放置在4°C的冰上24-48小时，可以重新变为液态。

使用方法

Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free可以用作薄的凝胶层（0.5 mm），细胞放置在上面。细胞也可以在Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free内培养，使用1 mm的层厚。过度稀释会导致薄的、非凝胶化的蛋白质层。这对于细胞附着可能是有用的，但在分化研究中可能不太有效。

注意：Corning Matrigel基质产品的蛋白质浓度是批次特定的，并在分析证书上提供。为了获得一致的结果，请通过计算所需的特定蛋白质浓度（mg/mL）来稀释Corning Matrigel基质产品。为保持凝胶一致性，建议不要将Corning Matrigel基质稀释至低于3 mg/mL。使用预冷的无血清培养基来稀释Corning Matrigel基质。通过上下移液或在冰上旋转小瓶来混合。

薄凝胶法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free。使用冷却的吸管，将其混合均匀。

●将培养板放在冰上，每平方厘米培养表面加入50 µl的混合液。

●将培养板放置在37°C的细胞培养箱中，孵育30分钟。

●如有必要，在使用前吸去未结合的物质，并用无血清培养基轻轻冲洗（避免吸管的尖端不会刮伤涂层表面）便可使用。

厚凝胶法：

●根据推荐方法解冻Corning Cornin Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free。使用冷却的吸管，将其混合均匀。

● 将培养板放在冰上。将细胞加入Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free中，并使用冷却的吸管悬浮，每平方厘米培养表面加入150-200 µl。

●将培养板放置在37°C的细胞培养箱中，孵育30分钟后添加培养基。细胞也可以在这个凝胶上培养。

薄涂层法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free。使用冷却的吸管，将Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free混合均匀。

●使用无血清培养基稀释Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free至所需浓度。应进行预实验以确定适用的最佳涂层浓度。

●将稀释后的Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free加入要涂层的容器中。数量应足够覆盖整个生长表面。在室温下孵育一小时。

● 吸去未结合的物质，并使用无血清培养基轻轻冲洗，随后便可使用培养板。

细胞回收

使用Corning Cell Recovery Solution(Cat. No. 354253)或Corning Dispase(Cat. No. 354235)可以最有效地恢复生长在Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free上的细胞。Corning Cell Recovery Solution在冰上在7小时内将Corning Matrigel Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free降解，而Corning Dispase是一种金属酶，可以轻柔地释放细胞，从而实现连续培养。

参考文献

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