【Corning】354250 细胞回收（用于次级培养或生化分析）
（Corning® PuraMatrix™ Peptide Hydrogel）
（354250）
Corning® PuraMatrix™ Peptide Hydrogel (CorningPuraMatrix) 是一种用于创建定义的三维微环境的合成基质，可用于各种细胞培养实验。为了实现最佳的细胞生长和分化，需要确定该材料和生物活性分子（例如生长因子、细胞外基质（ECM）蛋白和/或其他分子）的适当混合比例。CorningPuraMatrix由标准氨基酸（1% w/v）和99%水组成。在生理条件下，CorningPuraMatrix的肽组分自组装成为具有 nm级纤维结构的3D水凝胶，平均孔径为50-200 nm。该水凝胶可以方便地在培养皿、多孔板或细胞培养插入物中形成。
CorningPuraMatrix除了可以提供3D细胞培养，还能够进行更简单的2D培养。许多细胞类型在CorningPuraMatrix表面培养时形成适当的3D形态，与细胞夹心培养系统相比，简化了开发3D体外模型系统所需的工作。研究表明，与2D培养的细胞相比，形成3D结构的细胞更接近其体内对应物。CorningPuraMatrix允许定义的微环境更好地再现体内环境，从而提高在高通量环境中进行的实验所得结果的预测质量。
研究表明，CorningPuraMatrix支持肝祖细胞、大鼠嗜铬细胞瘤细胞（PC12）和海马神经元的分化，同时促进内皮细胞的管状生成。研究还表明，CorningPuraMatrix支持各种原代细胞（例如神经元、成纤维细胞和角质形成细胞）和转化细胞（例如MG-63、SH-SY5Y、HEK293和NIH3T3）的附着。其他潜在的应用包括干细胞增殖和分化、肿瘤细胞迁移以及组织再生的体内分析。CorningPuraMatrix具有生物相容性、可吸收性，并且不含动物来源的材料和病原体。对于动物体内研究，可将可溶性材料注射到体内，随后在与生理环境接触时形成3D水凝胶。
表 1 PuraMatrix™ Peptide Hydrogel 354250产品信息
细胞回收
● 通过重复移液培养基和凝胶的方法，在孔或细胞培养插件中机械破坏Corning PuraMatrixPeptide Hydrogel和细胞。
●转移到一个15毫升离心管中。使用另一半到满量的PBS来冲洗孔或细胞培养插件，并将其与管中的液体结合。
●低速离心五分钟。丢弃上清液。管底的沉淀包含细胞和Corning PuraMatrixPeptide Hydrogel碎片。
●用2毫升PBS重悬沉淀，离心，再次收集沉淀。
●用1毫升胰蛋白酶-EDTA重悬沉淀，并在37℃孵育5-10分钟。这将帮助分离仍然相互附着的细胞。
●添加5毫升培养基，重新离心。
●向沉淀中添加500微升培养基（用于再培养）或PBS（用于生化分析），通过移液混合。离心并丢弃上清液。此时，一些细胞可能仍然附着有Corning PuraMatrixPeptide Hydrogelx的残留“标记”，无法去除。
●对于生化和分子分析，向沉淀中加入所选择的缓冲液以溶解细胞。
●对于细胞播种，转移含培养基的沉淀到新的细胞培养板或插件中。细胞可以重新封装（参见D和E部分），在一层Corning® PuraMatrix™上表面播种（参见“Corning PuraMatrix Peptide Hydrogel细胞封装过程”部分），或直接播种在塑料培养板上（无涂层或涂有ECM蛋白）。
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