【Corning】354250 在体内输送细胞和/或生物活性分子的应用

【Corning】354250 在体内输送细胞和/或生物活性分子的应用


(Corning® PuraMatrix™ Peptide Hydrogel)

(354250)

Corning® PuraMatrix™ Peptide Hydrogel (CorningPuraMatrix) 是一种用于创建定义的三维微环境的合成基质,可用于各种细胞培养实验。为了实现最佳的细胞生长和分化,需要确定该材料和生物活性分子(例如生长因子、细胞外基质(ECM)蛋白和/或其他分子)的适当混合比例。CorningPuraMatrix由标准氨基酸(1% w/v)和99%水组成。在生理条件下,CorningPuraMatrix的肽组分自组装成为具有 nm级纤维结构的3D水凝胶,平均孔径为50-200 nm。该水凝胶可以方便地在培养皿、多孔板或细胞培养插入物中形成。

CorningPuraMatrix除了可以提供3D细胞培养,还能够进行更简单的2D培养。许多细胞类型在CorningPuraMatrix表面培养时形成适当的3D形态,与细胞夹心培养系统相比,简化了开发3D体外模型系统所需的工作。研究表明,与2D培养的细胞相比,形成3D结构的细胞更接近其体内对应物。CorningPuraMatrix允许定义的微环境更好地再现体内环境,从而提高在高通量环境中进行的实验所得结果的预测质量。

研究表明,CorningPuraMatrix支持肝祖细胞、大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)和海马神经元的分化,同时促进内皮细胞的管状生成。研究还表明,CorningPuraMatrix支持各种原代细胞(例如神经元、成纤维细胞和角质形成细胞)和转化细胞(例如MG-63、SH-SY5Y、HEK293和NIH3T3)的附着。其他潜在的应用包括干细胞增殖和分化、肿瘤细胞迁移以及组织再生的体内分析。CorningPuraMatrix具有生物相容性、可吸收性,并且不含动物来源的材料和病原体。对于动物体内研究,可将可溶性材料注射到体内,随后在与生理环境接触时形成3D水凝胶。


表   PuraMatrix™ Peptide Hydrogel 354250产品信息


在体内输送细胞和/或生物活性分子的应用


可使用小口径或大口径针头和导管对Corning PuraMatrix Peptide Hydrogel进行处理。小口径针头可能会产生气泡。为了避免在体内引入气泡,使用小于20G的针头和注射样品时要非常小心。在使用之前,可以使用0.20或0.45µm的膜过滤器重新过滤材料,并应将材料进行涡旋或超声处理以降低粘度。

尽管Corning PuraMatrix Peptide Hydrogel能够以低pH值注射,但某些注射部位可能对暴露酸性样品中不耐受。此外,细胞对低pH值的暴露很敏感。因此,在将材料注射到动物体内之前,可以使用以下方案来缓冲和凝胶化材料。

① 为了准备200 µl的注射样品,首先将50µl的细胞/10%蔗糖悬液分装到一个小管中。

② 添加50 µl的Corning PuraMatrix Peptide Hydrogel并轻轻混合。

③ 立即将100 µl含有Ca2+和Mg2+的PBS小心地层叠在细胞/水凝胶混合物上。

④ 在室温下静置1分钟。用P200微量移液器尖端轻轻混合。

⑤ 使用20-22G的针头将整个混合物抽入1cc注射器中。通过缓慢而小心地收集液体来避免气泡产生。

⑥ 推荐更换针头进行注射。一般而言,组织注射和皮下注射分别使用30G或26G的针头。

注意:可根据所使用的动物和注射部位的要求进行比例缩放。注射的细胞数量应根据实验的目标经验确定。


 参考文献


[1] Semino, C.E., et al., Differentiation 71:262 (2003).

[2] Holmes, T.C., et al., PNAS USA 97:6728 (2000).

[3] Semino, C.E., et al., Tissue Engineering 10:643 (2004).

[4] Narmoneva, D., et al., Biomaterials 26:4837 (2005).

[5] Zhang, S., et al., Biomaterials 16:1385 (1995).

[6] Thonhoff, J.R., et al., Brain Research 1187:42 (2008). 


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