【Corning】354259 产品使用说明
Corning® Laminin/Entactin High Concentration
(354259)
Corning® Laminin/Entactin High Concentration是一种高浓度的细胞外基质(ECM)配方,可用于研究细胞在3D条件下的分化和功能,并可作为Corning Matrigel Matrix的一致替代品。可应用于内皮细胞的管结构形成以及无饲养层的人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞的培养。
表 1354259产品信息
包被过程
●将Corning®Laminin/Entactin高浓度复合物在冰上解冻,无菌条件下分装,并将备用分装物在-70℃储存(不建议多次冻融)。
●为了进行涂层包被,将Corning®Laminin/Entactin高浓度复合物用预冷的DPBS稀释至终浓度50 µg/mL。操作所用的移液器及培养容器应提前预冷,并将涂层溶液始终保持在冰上。
● 将1 mL的涂层溶液加入到每个Falcon 6孔板的孔中。在室温下孵育1-2小时。
●将未凝固的涂层溶液从板子中吸除(避免碰到凝固层),然后加入2 mL培养基到每个孔中。
●板子在37℃、5% CO2细胞培养箱中孵育30分钟,随后加入细胞进行培养。已包被涂层的板子可以在4℃下储存,并在涂层后一周内使用(使用板子前应将涂层溶液吸除)。
表 2 Corning®Laminin/EntactinComplex High Concentration可维持人胚干细胞的未分化状态
Figure from Laminin/Entactin Complex: A Feeder-Free Surface for Culture of Human Embryonic Stem Cells Deepa Saxena, Ph.D. and Susan Qian, Ph.D.
在Corning®Laminin/Entactin复合物高浓度上培养的H9细胞中,表达了未分化的hES细胞标记物。细胞在MEF-CM(a和b)和mTeSR1维持培养基(c和d)中染色为Oct-3/4(红色)和SSEA-4(绿色)的阳性标记。
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