【Cytiva】Percoll 细胞分离液相关问题解答

【Cytiva】Percoll 细胞分离液相关问题解答


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问题一:用两步法将Percoll母液配成 25%,32%,47% 等浓度具体操作如何?

制备 SIP:对于普通的细胞,将 9 份 Percoll 加入到 1 份 1.5M NaCl 或 1 份 10×浓缩培养基中,通过加盐或者蒸馏水可以最终调节到所需要的渗透压;对于有盐存在时会发生聚集的亚细胞颗粒,可以通过添加 9 份 Percoll 到 1 份 2.5M 的蔗糖中来制备 SIP(制成的 SIP 可以理解为 100% 的 Percoll,也有文献中将 SIP 理解为 90% 的 Percoll,具体看文献中的做法)

稀释到终浓度:对于细胞,可以添加 0.15M 的 NaCl,对于亚细胞颗粒或病毒则添加 0.25M 的蔗糖。最终按照比例进行稀释,得到不同百分比的分离液。

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