【Gibco】 Advanced Reduced Serum Media

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gibco 12491015 12491023 12634010 12634028 12492013 12492021 12633012 12633020

Advanced Reduced Serum Media与传统基础培养基相比，需要的胎牛血清（FBS）补充量减少50-90%，且能够支持细胞增殖和最大细胞密度，可与传统基础培养基配制的含有5-10% FBS的培养基相媲美，甚至在某些情况下表现更优秀。不挑剔的细胞系甚至可能能够容忍更大幅度的血清减少。这些培养基在繁殖各种细胞类型方面的多功能性使其成为许多细胞培养需求的最佳选择。Advanced Reduced Serum Media不含L-谷氨酰胺，因此更加稳定。

Advanced DMEM

(Dulbecco's Modified Eagle Medium)

（货号：12491015、12491023）

Advanced DMEM/F-12

(Dulbecco's Modified Eagle Medium ⁄ Ham’s F-12)

（货号：12634010、12634028）

Advanced MEM

(Minimum Essential Medium)

（货号：12492013、12492021）

Advanced RPMI 1640

（货号：12633012、12633020）

推荐的血清水平和接种密度

使用方法

培养基的配制

Advanced Reduced Serum Media使用前需要补充 L-谷氨酰胺（Cat：25030 ）和 1–5% FBS4 mM GlutaMAX™-I （Cat：35050 ）补充剂或4 mM GlutaMAX™-I （Cat：35050 ）补充剂。

对于1升Advanced Reduced Serum Media：

① 无菌地加入20毫升 GlutaMAX™-I 补充剂或 L-谷氨酰胺（200毫摩尔）。

② 无菌地加入10-50毫升/升胎牛血清（FBS）。

注意：为每个细胞系优化胎牛血清的浓度，以获得最大的血清减少效果。如有需要，加入抗生素。抗生素的添加可能会影响细胞生长。建议将抗生素的用量按照血清补充减少的百分比进行减少。

③ 适应降低血清培养基的细胞系对于大多数应用，无需适应（参见直接适应）即可实现至少50%的血清补充水平降低。如果观察到细胞生长特性不佳（例如生长速率、形态或次生代谢产物产量），或者希望进一步减少血清，则使用顺序适应程序。成功的适应将取决于特定的细胞系和使用的培养条件。建议在使用新培养基取得成功之前，保留备份培养基。

注意：为获得最佳效果，细胞存活率应≥90%，生长速率应在适应之前处于中期对数生长阶段。

直接适应法培养

① 将在含有5-10% FBS的传统培养基中生长的细胞进行分代培养，转移到相应预温的完整Advanced Reduced Serum Media中。根据建议的播种密度进行播种。

② 使用相应预温的完整Advanced Reduced Serum Media，按照您的正常方案监测细胞生长和分代培养。

③ 经过3-5代一致生长后，细胞培养被认为已适应。

注意：如果在3-5代中使用直接适应方法观察到细胞表现不佳，可使用顺序适应方法。

顺序适应法培养

① 将在含有5-10% FBS的传统培养基中生长的细胞进行分代培养，转移到与原始培养基的适当比例预温的完整Advanced Reduced Serum Media（25:75比例）。根据建议的播种密度进行播种。

② 使用您的正常方案监测细胞生长和分代培养，逐步增加新培养基与原始培养基的比例（50:50，然后是75:25，最后是90:10）。可能需要在每个步骤进行多次传代。

③ 将细胞分代培养到100%预温的完整Advanced Reduced Serum Media中，并继续监测和传代细胞，直到获得一致的生长。在100%完整高级降低血清培养基中经过几次一致的生长和存活后，培养被认为已经适应。

其他细胞品类