【Promega】Factor Xa Protease和HaloLink™ Protein Array Systems
Factor Xa Protease
说明
Factor Xa Protease(Xa 因子蛋白酶) 从小牛血浆中纯化得到,经过 Russell 蛇毒来源的酶激活处理。Xa 因子蛋白酶的功能是优先剪切 Xa 蛋白的氨基酸序列 IIe-Glu-Gly-Arg 中的 Arg 后面肽键。
推荐的反应缓冲液:20mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1M NaCl。
储存条件:分装成小份,储存于 -20℃。
HaloLink™ Protein Array Systems
说明
蛋白阵列能够平行分析多组蛋白:蛋白、蛋白:药物或者蛋白:核酸之间的相互作用。HaloLink™ Protein Array Systems(HaloLink™蛋白阵列系统 ) 提供了一种新的创建自制 (按用户需求 ) 蛋白阵列的方法,该方法是创新的 HaloTag® 技术、表面材料工程以及无细胞蛋白表达系统等优势的结合。
HaloTag® 蛋白是一个突变的水解酶,能够与 HaloTag® 配基形成共价结合。在生理条件下,该结合反应快速、特异性高,得到的复合物在苛刻条件下依然能够保持稳定。使用 HaloLink™ 蛋白阵列系统时,在无细胞表达系统中表达出 HaloTag® 蛋白,然后在水凝胶包被的玻片上被共价捕获,该玻片连接着 HaloTag® 配基。在无细胞表达系统中产生的融合蛋白无需预先纯化,可以直接用于蛋白捕获。使用这种方法可以在玻片表面同时快速合成和固定多个融合蛋白。在不到8 小时内,可以完成包括表达蛋白、制定蛋白阵列布局和分析蛋白相互作用在内的一整套实验。
HaloLink™ Array Two Slide Systems (HaloLink™ 阵列双玻片系统,Cat.# G6140 和 G6180) 内含 HaloLink™ 玻片、HaloLink™ 密封垫 ( 可用于制成 50 孔的阵列 )、HaloTag® 标准蛋白、抗 HaloTag®抗体和一个无细胞表达系统 [TNT® T7 Quick Coupled Transcription/Translation System (Cat.# G6140),或 TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System (Cat.# G6180)]。
HaloLink™ Array Six Slide System(HaloLink™ 阵列六玻片系统) 内含 HaloLink™ 玻片、HaloLink™ 密封垫和抗 HaloTag® 抗体。
欲使用六玻片系统,您需要自己准备蛋白表达系统或者订购 TNT®T7 Quick Coupled Transcription/Translation System (Cat.# L1170或 L1171) 或 TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System (Cat.# L3260 或 L3261)。六玻片系统中不包含 HaloTag® Standard Protein (HaloTag® 标准蛋白,Cat.# G4491),但可以单独购买。
HaloTag® 技术提供了一种快速和简便的方法,通过荧光HaloTag® TMR 配基标记加上 SDS-PAGE 分析来检测 HaloTag® 融合蛋白的表达。HaloLink™ Protein Array 技术手册 (TM310) 中有操作指南。
特点
• 快速生产蛋白:无细胞表达系统可以在单管中用偶联的转录 / 翻译方式快速生产目的蛋白,用于蛋白阵列实验。
• 蛋白捕获是不可逆的:使用其它亲和标签进行捕获的蛋白易于从结合物的表面脱离下来,本方法与此不同,HaloTag® 融合蛋白与 HaloLinkTM 玻片是共价结合的。
• 无需蛋白纯化步骤:目的蛋白直接从无细胞表达反应体系中被捕获。
• 非特异结合减少:HaloLinkTM 玻片具有独特的水凝胶包被,此设计可以防止非特异结合,同时保护特异结合的蛋白的功能。
• 可耐受反复冲洗:HaloTag® 融合蛋白和 HaloLinkTM 玻片的共价结合可耐受反复而严格的冲洗,这能减少背景和降低假阳性率。
• 无需机械手:每个阵列为 50 个点,可手工完成多个相互作用的同时研究,无需复杂的机械手。
储存条件:TNT® 裂解液储存于 –70℃。HaloTag® 标准蛋白和抗HaloTag® 抗体储存于 –20℃。HaloLinkTM 蛋白阵列玻片应该储存于–20℃,并在使用前才打开。打开后,未使用的玻片应储存于–20℃,并应在一个月内使用。HaloLinkTM 阵列密封垫储存于室温中。
不要在非 –70℃处储存 TNT® 裂解液。储存在其它温度 ( 例如,–20℃ )时,其活性会在短时间内显著降低。
不要将 TNT® 裂解液冻融超过两次。
不要将 TNT® 裂解液储存于干冰中。长期暴露于干冰中会导致活性的严重损失。
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