【Promega】TetraLink™ 四聚抗生物素蛋白树脂和PinPoint™ Xa 蛋白纯化系统
TetraLink™ Tetrameric Avidin Resin
说明
TetraLink™ Tetrameric Avidin Resin (TetraLink™ 四聚抗生物素蛋白树脂) 可从复杂的蛋白质混合物中结合并固定带有生物素的蛋白。抗生物素蛋白 - 生物素之间的高亲和力 (Kd=10-15M) 使得抗生物素蛋白能够高效地捕获生物素标记的蛋白,并在多种洗涤条件下保持该复合物的稳定性。这种树脂可用于生产含有固定蛋白质的亲和树脂,同时,也是 PinPoint™ Xa Protein Purification System(PinPoint™ Xa蛋白纯化系统 ) 的互补产品,后者可以方便地表达带有生物素纯化标签的重组蛋白质。
特点
• 高亲和力结合:生物素 - 抗生物素蛋白之间的相互作用强度可使结合带生物素蛋白质的反应基本上不可逆。
• 通用:在较大范围的 pH、低或高离子强度、6M 的胍类和 1%SDS 条件下,仍能保持结合生物素的能力。
• 可重复使用:装填进亲和柱时,可重复使用,而不丧失结合能力。
• 强劲:在批量应用中,可耐受高流速 (300cm/ 小时 ) 和强离心力(1,500X g)。
储存条件:储存于 4℃。
PinPoint™ Xa Protein Purification System
说明
PinPoint™ Xa Protein Purification System (PinPoint™ Xa 蛋白纯化系统) 被设计用于制备和纯化体内表达的生物素化的融合蛋白。将编码目的蛋白的 DNA 克隆到 PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体) 的下游,该位置编码的肽段在体内可被生物素化。生物素化融合蛋白在大肠杆菌内生成,然后用 SoftLink™ Soft Release AvidinResin 进行亲和纯化。该树脂是基于专利技术设计的,可将融合蛋白以非变性形式洗脱出来。PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体 ) 的特点是含有编码内源蛋白酶因子 Xa( 发音为 "ten a") 的蛋白水解位点,使得纯化标签可从天然蛋白上分离。载体还带有多克隆区域,便于方便地构建融合蛋白。
该系统中含有几种载体,这些载体涵盖了所有可能的有义读码框。此外,该系统还包含有抗生物素蛋白偶联的树脂、链霉亲和素 - 碱性磷酸酶、纯化柱和生物素。系统中的 PinPoint™ Xa Control Vector(PinPoint™ Xa 对照载体 ) 含有氯霉素转乙酰基酶 (CAT) 基因,用于监控蛋白表达、纯化和加工条件。使用该系统,每升培养物通常的蛋白产量为 1-5mg。
特点
• 体内自行添加生物素标签:可用于纯化融合蛋白;很多蛋白纯化产物都是可溶的。
• 易于使用:使用 SoftLink™ 树脂纯化带有生物素标签的蛋白质,可以借助纯化柱,也可以进行批量处理。
• 便于检测:链霉亲和素碱性磷酸酶可用于检测带生物素标签的融合蛋白,以虚拟 Western 方式,监控纯化过程。
• 灵活:提供的 PinPoint™ 载体涵盖了所有读码框。
• 温和的释放条件:使用 SoftLink™ 树脂时,可在非变性条件下释放融合蛋白。
• tac 启动子:可以严格调控蛋白表达。
储存条件:将 PinPoint™ Purification Column 储存于室温。其他成份储存在 4℃。载体可储存在 -20℃。
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