【Promega】HisLink™ 蛋白纯化树脂和HisLink™ 96 孔蛋白纯化系统
HisLink™ Protein Purification Resin
以上体积为 50% 的悬浮液。
说明
HisLink™ Protein Purification Resin (HisLink™ 蛋白纯化树脂)是大孔硅胶树脂,经修饰含有高水平的四价鳌合镍离子 (>20mmol Ni/ 每毫升静置后的树脂 )。该树脂被设计用于高效地捕获和纯化细菌表达的带有多聚组氨酸或 HQ 标签的蛋白,通常也可以用作固定金属亲和层析 (IMAC) 的填料。HisLink™ Resin 的使用形式既可以是柱纯化,也可以是批量纯化。将 HisLink™ Resin 装填分离柱,经过澄清的细菌裂解物因重力流经分离柱,流速足以保证带有多聚组氨酸或 HQ 标签的蛋白被充分捕获和有效洗脱。使用真空过滤装置(如:Vac-Man® Vacuum Manifold [Cat.# A7231]),可达到同时处理多个分离柱的目的。同时,使用低至中压液相色谱诸如 FPLC 时,HisLink™ Resin 也是一个纯化多聚组氨酸或 HQ 标签蛋白的很好选择。批量处理时,HisLink™ Resin 可被简单地与裂解物分离,而不需要过滤 ( 或离心 ),可以在不去除裂解物中不溶性细胞碎片的情况下,处理大体积的样品,纯化蛋白。
特点
• 优化的产量:结合容量高 (>15mg/ml)。
• 省时:可从细胞粗提物或澄清的裂解物中纯化带有多聚组氨酸或HQ 标签的蛋白。
• 灵活:既可以使用标准的重力分离柱色谱,也可以使用自动化设备如 FPLC。
HisLink™ 96 Protein Purification System
说明
HisLink™ 96 Protein Purification System (HisLink™ 96 孔蛋白纯化系统) 提供了一种简单、快速、功能强大的蛋白纯化方法,这是一种基于真空抽滤的方法,用于纯化从 E. coli 中表达的带有多聚组氨酸或 HQ 标签的蛋白。该系统可直接从深孔、96 孔板中纯化表达多聚组氨酸或 HQ 标签的蛋白。HisLinkTM 96 系统可采用手动方法,也可采用自动化工作站如 Beckman Coulter Biomek® 2000 或 FX 进行高通量操作。
使用系统中提供的 FastBreak™ Cell Lysis Reagent,即可将带有多聚组氨酸或 HQ 标签蛋白的细菌细胞在培养中直接裂解。
HisLink™ Resin 可直接加入细菌裂解物中,多聚组氨酸或 HQ 标签蛋白可在几分钟内结合到树脂上,然后,将样品转移至过滤板上,未结合的蛋白被洗掉,目标蛋白用咪唑洗脱获得。
特点
• 简单:不需要离心;裂解缓冲液是直接加入细胞培养液中。
• 快速:细胞裂解时,不需要长时间的溶菌酶孵育。
• 通用:蛋白纯化既可手动操作,也可在自动化工作站上进行操作。
• 高效:最大结合能力可达到每孔结合 1mg 带有多聚组氨酸标签的蛋白。
储存条件:将整个系统储存于 4℃。过滤 / 收集板可储存于 4℃或室温。
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