【Promega】HaloTag®蛋白纯化系统和抗 HaloTag®多抗

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promega G6280 G6270 G8252 G2751 G2681 L3002

HaloTag® Protein Purification System

Cat.# G6280 体系为 100ml，含有的 HaloLink™ 树脂、TEV 蛋白酶和 HisLink™ 树脂悬浮液，占总体积的 25%。Cat.# G6270 体系为 10ml，含有的 HaloLink™ 树脂、TEV 蛋白酶和HisLink™ 树脂悬浮液，占总体积的 25%。对于批量订购（如大于 100ml）HaloLink™ 树脂的客户，我们提供有竞争力的价格。请询价。

说明

HaloTag® Protein Purification System (HaloTag®蛋白纯化系统)被设计用于纯化 HaloTag® 融合蛋白，HaloTag® 是一种新型蛋白标签，能够增强重组蛋白的表达产率和可溶性。HaloTag® 技术能够将目的蛋白以共价结合的形式、高效并特异地捕获到 HaloLink™ 树脂上，因此克服了其它使用亲和标签进行蛋白纯化的方法所带来的、基于平衡反应的限制因素 ( 例如，低水平表达蛋白的低效捕获和冲洗纯化树脂导致的蛋白流失 )。

可利用 HaloTag® 技术快速、方便地检测 HaloTag® 融合蛋白，也可监测 HaloLink™ 树脂对蛋白的固定化效率，这是通过使用 HaloTag® TMR 荧光配基进行标记，然后再进行 SDS-PAGE 而实现的。实验指南可在下述技术手册中找到：HaloLink™ Resin 技术手册 #TM250, HaloLink™ Protein Array 技术手册 #TM310, 和HaloCHIP™ System 技术手册 #TM075。

实验过程概述

HaloTag® 蛋白是一个 34kDa 的突变水解酶，通过一个被固化的氯化烷配基与 HaloLink™ 树脂发生共价结合。TEV 蛋白酶可从HaloLink™ 树脂上将目的蛋白切下。TEV 蛋白酶具有一个 N 端 HQ标签，可以使用 HisLink™ 树脂与目的蛋白分离开，这样就得到了纯化的目的蛋白。编码 HaloTag® 蛋白并能够在大肠杆菌中使目的蛋白达到最优表达的最适载体是 pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector(G2751) 和 pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector (G2681)。这些载体可以单独购买。

特点

• 与 His-Tag, GST 和 MBP 亲和标签相比较，本系统产量大、纯度高、能够获得具有功能的可溶性蛋白：HaloLink™ 树脂以共价结合的方式捕获和固定 HaloTag® 融合蛋白，特异性高。

• 在原核、哺乳动物细胞和无细胞表达系统中，目的蛋白的表达得到增强：蛋白以 HaloTag® 融合蛋白的形式表达。

• 纯化表达量少的融合蛋白：HaloLink™ 树脂能快速、特异性地以共价结合的方式捕获 HaloTag® 蛋白，这是一个非平衡过程。

• 使用 TEV 蛋白酶剪切，可高效回收目的蛋白：TEV 蛋白酶剪切HaloTag® 蛋白和目的蛋白之间的连接肽段，其识别位点已经经过优化。由于是共价连接，HaloTag® 蛋白仍固定在树脂上。

• 节省时间：仅使用一种与下游应用兼容的缓冲液，即可支持所有的纯化步骤。

• 使用 HaloTag® 荧光配基可轻松实现凝胶内检测和蛋白表达水平的定量：HaloTag® 蛋白 - 配基相互作用非常稳定，可以在含有SDS 的样品缓冲液中煮沸，并直接使用 SDS-PAGE 分离。

储存条件：将 HaloLink™ 树脂和 HisLink™ 树脂储存于 4℃。不要将树脂冷冻。将 TEV 蛋白酶储存于 –20℃。

Anti-HaloTag® pAb

说明

Anti-HaloTag® pAb(抗 HaloTag®多抗) 是一种纯化的抗HaloTag® 蛋白的兔多克隆抗体。该抗体通过 G 蛋白亲和树脂纯化，以 1mg/ml PBS 溶液的形式提供。在 Western blot 杂交和免疫组化应用当中，可高灵敏、高特异地检测 HaloTag® 融合蛋白。HaloTag®蛋白对于哺乳动物，植物以及 E.coli 没有内源活性。已经证实 E.coli和哺乳动物细胞提取物对 Anti- HaloTag® pAb 有低交叉活性。

特点

• 特异性：Anti-HaloTag® pAb 是一种对 HaloTag® 蛋白特异性的抗体，对 E.coli 和哺乳动物细胞提取物有低交叉活性。

储存条件：储存于 -20℃。