【Promega】TNT® SP6高产率蛋白表达系统和TNT®快速转录 / 翻译偶联系统
TnT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System (cell free protein expression)
说明
TNT® SP6 High-Yield Protein Expression System (TNT® SP6高产率蛋白表达系统 ) 是一种基于优化的麦胚提取物,在单管内进行的偶联转录 / 翻译系统,可在两个小时之内表达蛋白。生成的蛋白浓度在 10-100mg/ml 之间,可以用于多种基于蛋白质组方面的研究,也可以用于高通量分析。
除质粒 DNA 或 PCR 模板外,麦胚提取物提供转录 / 翻译过程所需的全部成分。蛋白标记试剂由使用者自行提供。
特点
• 节省时间:可以在两个小时内生成蛋白,相对基于细胞的系统(E.coli) 需几天才能获得蛋白,大大节省反应时间。
• 可选模式:可使用质粒 DNA 或 PCR 产物模板生产蛋白。
• 高产率:蛋白产率高于其他无细胞表达系统 10 到 20 倍,达到10-100mg/ml。
• 生成可用蛋白:生成可溶的全长蛋白,可避免 E.coli 系统出现的问题。
储存条件:储存于 -70℃。
TnT® Quick Coupled Transcription/Translation
System (cell free protein expression)
Cat.# L1171, L4581, L4591 为实验室用。
说明
TNT® Quick Coupled Transcription/Translation System(TNT®快速转录 / 翻译偶联系统) 可方便地在一个试管内进行偶联的转录 /翻译反应,适合真核生物无细胞蛋白质表达。TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统将 RNA 聚合酶、核苷酸、盐类、氨基酸、重组的 RNasin®核酸酶抑制剂与网织红细胞裂解物混合在一起,形成了 TNT® 快速混合母液 (Master Mix)。
TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统有两种配置,分别对克隆在 T7 或SP6 RNA 聚合酶启动子下游的基因进行转录和翻译。使用这两种系统时,模板 DNA 的量为 0.2-2.0mg,模板可以是带有 T7 或 SP6 启动子的环状质粒 DNA,也可以是含有 T7 启动子的 PCR 片段,将模板加入到 TNT® 快速混合母液,反应体系为 50ml,30℃下孵育 60-90分钟。表达反应可产生足够量的蛋白,用于包括 GST pull-down 和凝胶阻滞电泳在内的多种实验。
无细胞体系表达出的蛋白的应用范围:
• GST pull-downs
• 凝胶阻滞电泳
• 免疫共沉淀
• 蛋白质修饰的特征研究
• 蛋白: RNA 相互作用
• 蛋白活性研究
• 基因产物的确认
• 蛋白截短实验 (PTT)
欲获取有关无细胞蛋白表达的更多信息,请点击 www.promega.com/paguide 查看 Promega Protocols & Applications Guide。
特点
• 应用广泛:TNT® 系统被广泛地应用于蛋白:蛋白、蛋白:核酸相互作用以及其他研究领域中。
• 省时:使用单管反应,即可在短至一个小时内获得蛋白产物,优于需几天才能产出蛋白的体内翻译方法。
• 体系完整:体系提供了您实验所需的全部试剂 ( 同位素除外 )。
• 可信:无需考虑使用哺乳动物体外翻译系统常见的蛋白产物可溶性问题。
• 可靠:TNT® 快速系统经过严格的质量控制,确保最高水平的蛋白表达。
储存条件:储存于 -70℃。不要将裂解物冻融 2 次以上。
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