【Promega】pCMVTNT™ 载体、pTNT™ 载体和pAdVAntage™ 载体
pCMVTnT™ Vector
说明
pCMVTNT™ Vector(pCMVTNT™ 载体) 专为在体内和体外表达系统中方便表达克隆基因设计。SP6 和 T7 聚合酶启动子前后相接，毗临多克隆位点，这种设计允许基于 SP6 和 T7 偶联的体外转录 / 翻译系统进行基因表达。RNA 噬菌体启动子的存在可以进行 RNA 体外的高效合成。pCMVTNT™ 载体还带有 5' b 球蛋白引导序列，有文献提到该序列可促进某些基因的体外表达。对于体内蛋白表达，该载体含有一个 CMV 增强子 / 启动子区域，在多种细胞系中该区域可保证稳定的组成型表达。b 球蛋白 /IgG 嵌合的内含子位于 CMV 增强子 /启动子的下游，晚期 SV40 多聚腺苷酸化位点位于多克隆位点的下游。
特点
• 体内表达：在多种细胞系中，CMV 增强子 / 启动子区域可保证稳定的组成型表达。
• 灵活：该载体含有前后相接的 SP6 和 T7 噬菌体启动子，可在适合的体外翻译或转录系统中使用。
• 方便：多克隆位点的存在为克隆时的限制性酶切提供了多种选择。
储存条件：储存于 -20℃。
pTnT™ Vector
说明
pTNT™ Vector(pTNT™ 载体) 用于将克隆的基因在体外进行方便的表达。SP6和T7聚合酶启动子前后相接，毗连多克隆位点，因此，可以基于 SP6 或 T7 RNA 聚合酶的体外转录 / 翻译偶联系统进行基因表达。RNA 噬菌体启动子的存在也能够进行高效的 RNA 体外合成。同时，pTNT™ 载体包含一个 5'b- 球蛋白前导序列和合成的 poly(A)30尾，经证明，两者都可以增强某些基因的表达。
特点
• 灵活：该载体包含前后相接的 SP6 和 T7 噬菌体启动子，能够在适当的体外转录或翻译系统中应用。
• 简便：多克隆位点的存在为克隆时的限制性酶切提供了多种选择。
储存条件：储存于 -20℃。
pAdVAntage™ Vector
说明
使用 pAdVAntage™ 载体共转染哺乳动物细胞，可通过促进翻译起始来增强多种类型细胞中蛋白的瞬时表达。
用表达载体转染哺乳动物细胞经常导致目的蛋白的表达不理想。
在转染过程中生成的双链 RNA (dsRNA) 被认为可将 dsRNA- 激活的抑制剂 (DAI) 激活 , 该抑制剂是参与宿主细胞抗病毒防御系统的多种酶中的一种。DAI磷酸化翻译启始因子eIF-2, 终止翻译和蛋白的生成。
但是，与 pAdVAntage™ 载体共转染过程中，DAI 的翻译抑制作用能被 RNA 聚合酶 III 产生的腺病毒相关 I 型 RNA(VAI RNA) 抵消。VAIRNA 与 DAI 结合，阻止其激活，从而完成翻译和蛋白表达。
特点
• 增强表达：在 293 和 HeLa 细胞系中，对照单独使用构建DNA 转染的效果，带有萤光素酶基因的载体与 pAdVAntage™ 载体共转染可使萤光素表达升高 10 倍以上。
• 灵活：能够用于多种细胞系。
储存条件：储存于 -20℃。
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