【Promega】GloResponse™ Luciferase Reporter Cell Lines

【Promega】GloResponse™ Luciferase Reporter Cell Lines

GloResponse™ Luciferase Reporter Cell Lines


每一项都含有两个管,每管的冷冻介质中大约有 2×106 个细胞。

说明

GloResponse™ Luciferase Cell Lines(GloResponse™萤光素酶细胞系 ) 经过优化,将最先进的萤光素酶报告基因技术整合入细胞系中。这样可以迅速开发新的检测方法,这些方法是基于目的信号转导通路对萤光素酶基因进行调控而设计的。使用 GloResponse™ 细胞系形成的检测方法适用于高通量筛选。这些检测方法一般比其它检测方法具有更宽的反应动态范围 ( 诱导倍数 ),以及更好的质量,正如高 Z' 值所示。GloResponse™ 细胞系可用于研究多种信号转导通路。这些信号通路的激活因子可以是 HEK293 细胞系所固有的,如需研究非内源性的激活因子的活性,可将这些激活因子转染进入细胞后进行研究。

GPCR 能调控广泛的生物学功能,是药物发现中最重要的靶点之一。根据 G 蛋白 α 亚基的不同可把 GPCR 信号通路分为三类:Gs,Gi/o 和 Gq。GloResponse™ CRE-luc2P HEK293 Cell Line 可应用于 Gs,Gi/o 偶联的 GPCR( 其信号通过 cAMP 和 CRE 传导 ) 的研究,并可用其设定筛选用的检测方法。对于 Gq 偶联的 GPCR( 其信号通过钙离子释放和激活“活化 T 细胞的核因子的反应元件,NFATRE”),应该使用 GloResponse™ NFAT-RE-luc2P HEK293 CellLine。

NF-κB-RE 是 NF-κB 转录因子复合物的 DNA 结合序列,负责调控炎症反应、免疫应答、细胞生长和细胞凋亡。GloResponse™ NF-κB-RE-luc2P HEK293 Cell Line 能够快速和方便地分析任何导致NF-κB 活性调节的细胞反应。

GloResponse™ 9XGAL4UAS-luc2P HEK293 Cell Line 含有 9个重复的 GAL4 UAS( 上游激活序列 ),当有配基激活的时候,能够驱动萤光素酶报告基因 luc2P 应答融合蛋白结合而产生的转录,该融合蛋白需要含有 GAL4 DNA 结合域,比如 pBIND-ERα 载体 (Cat.#E1390) 上的雌激素受体配基结合域。这使得该细胞系适合研究核受体或者其他类型的蛋白 : 蛋白以及蛋白: DNA 相互作用。必须使用转染或其它相似技术,将 GAL4 DNA 结合域相结合的“蛋白伙伴”导入细胞内方可。

GloResponse™ Cell Lines 通过克隆筛选稳定转染 pGL-4 载体的HEK293 细胞得到,该载体带有目的通路特异应答元件。这些细胞系整合了 pGL4 报告基因载体家族的优势。去稳定化的 luc2P 报告基因用于增强的转录动力学应答。luc2P 基因的密码子经过优化,以增强在哺乳动物细胞中的表达。pGL4 质粒的骨架也经过改造,降低本底表达。结果是,当目的信号通路被激活时,该细胞系就能被诱导产生高水平的反应。

特点

• 方便:细胞系是预先构建好的,并经过优化,带有萤光素酶报告基因。

• 强效:检测范围宽,诱导水平高,背景表达低。

• 快速:去稳定化的萤光素酶对转录调控的动态应答增强。

储存条件:将冻存细胞储存于–140℃或低于–140℃(机械式深冻或液氮的气相),直至准备解冻、传代。我们强烈推荐使用提供的流程尽快进行细胞传代。这能确保最佳的细胞活力和检测性能。

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