【Promega】Dual-Glo® 双萤光素酶检测系统和DualLuciferase® 双萤光素酶报告基因检测系统
Dual-Glo® Luciferase Assay System
说明
Dual-Glo® Luciferase Assay System(Dual-Glo® 双萤光素酶检测系统 ) 是一种均质检测系统，能够快速简便地从一个样品中定量两个报告基因的稳定的萤光信号。这种方便的“加样 - 检测”系统可直接用于未经过预处理或预裂解的细胞，产生萤火虫和海肾萤光素酶两种发光信号。Dual-Glo® 双萤光素酶检测系统为基于细胞的高通量筛选提供了高 Z' 因子。Dual-Glo® 系统可以构建内对照来减少样品间的差异，因为内对照能减少非特异性因素 ( 如细胞毒性 ) 造成的假阳性和假阴性结果。在 Dual-Glo® 双萤光素酶检测中，主报告基因的活性与特异性刺激互相影响，而共转染的对照报告基因活性提供了一个归一化的内对照。此系统是为批处理 96 孔和 384 孔板而优化设计，与大多数哺乳动物细胞培养基兼容。
特点
• 精确度和准确性更高：使用一个共报告基因作为内对照，减少了细胞数、细胞健康程度、转染效率和非特异性细胞反应的影响，使主报告基因的结果归一化 。
• 均质检测模式：操作步骤更少，可以直接在生长培养基上检测双报告基因，无需离心或裂解。
• 稳定的信号：对批量或连续处理 96 或 384 孔板的灵活性更强，每一种萤光信号在加入试剂长达 2 小时后还能检测到。
• 方便：使用这种简单的两步法的系统筛选效率更高，对于任何一台发光检测仪都适用。无需配置进样器。
• 动态范围宽：无需稀释样品就可直接分析高和低的报告基因活性。每个报告基因的线性范围都至少在 6 个数量级的酶浓度以上。
• 可定制或批量订购：想了解更多此产品的定制选项，请浏览：www.promega.com/myway/。
储存条件：Dual-Glo® Substrates 储存于 -20℃。Dual-Glo® Buffers要低于 25℃储存。
Dual-Luciferase® Reporter Assay System
说明
Dual-Luciferase® Reporter (DLR™) Assay System (DualLuciferase® 双萤光素酶报告基因检测系统 ) 为双报告基因检测提供有效的手段。在 DLR™ 检测中，萤火虫 (Photinus pyralis) 萤光素酶和海肾 (Renilla reniformis) 萤光素酶的活性可在单个样品中依次检测。首先检测萤火虫萤光素酶，将萤光素酶检测试剂 II(LuciferaseAssay Reagent II, LAR II)加入样品中，产生的光信号至少持续1分钟。
定量萤火虫萤光强度后，再在同一个样品中加入 Stop & Glo® 试剂，将上述反应终止，同时启动海肾萤光素酶反应。使用带有试剂自动注射器的发光检测仪，可在 4 秒内完成两个检测。在 DLR™ 检测系统中，两个报告基因产生的线性检测的灵敏度均可达埃摩尔级 (<10-18)，在实验宿主细胞内均无内源活性。而且，DLR™ 检测的一体化模式既可快速定量检测转染细胞，也可用于快速定量检测无细胞转录 / 翻译反应体系中的两个报告基因。
为了得到 Dual-Luciferase® 试剂盒的最佳检测结果，Promega推荐使用针对该检测过程进行过确证的发光检测仪。这些发光检测仪均带有 DLReady™ 标识。请参阅“通过 DLReadyTM 确证的发光检测仪”页面，来了解相应的仪器信息。
pGL4 萤光素酶报告基因载体是针对 DLR™检测系统而设计。组成型表达的海肾萤光素酶载体可与任何实验用萤火虫萤光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。
Cat.# E1960 和 E1980 产品请注意：系统中已提供了足够的Passive Lysis Buffer，能够进行 96 孔板细胞的 1,000 次检测 ( 一般 每 孔 用 20ml 1X PLB)。若 需 要 更 多 的 Passive Lysis Buffer( 如>100ml/ 孔 )，可单独购买。
特点
• 准确性更高：使用海肾萤光素酶做内对照可得到更精确的结果。
• 方便：无需分开样品，可节省平板和时间。
• 灵敏：可用于研究弱启动子，低水平表达 / 调控和转染不佳的细胞的表达。
• 线性范围：线性范围超过 7 个数量级；活性很高的样品一般无需稀释。
• 储存条件：储存于 -20℃。
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