【Promega】DPPIV-Glo™ Protease Assay 和 Proteasome-Glo™ Assays

实验室用。Cat.# G8350 提供了足够的试剂进行下述实验：96 孔板检测时，100 个孔 ( 反应体系为 100µl/ 孔 ) 或 200 个孔 ( 反应体系为 50µl/ 孔 )；384 孔板检测时，400 个孔 ( 反应体系为 25µl/ 孔 )。Cat.# G8351 提供了足够的试剂进行下述实验：96 孔板检测时，500 个孔 ( 反应体系为 100µll/ 孔 ) 或 1,000 个孔 ( 反应体系为 50µl/ 孔 )；384 孔板检测时，2,000 个孔 ( 反应体系为 25µl / 孔 )。

DPPIV-Glo™ Protease Assay (DPPIV-Glo™ 蛋白酶检测试剂盒) 是一种均质的发光检测方法，用于检测二肽酶 IV(DPPIV) 的活力。

DPPIV 是一种丝氨酶蛋白酶，它可以从多肽 N 端倒数第二个 L- 脯氨酶或 L- 丙氨酸位点处切断多肽。DPPIV-GloTM 蛋白酶检测试剂盒系统提供了 DPPIV 底物，该底物为发光前体，Gly-Pro- 氨基萤光素，上述物质存在于经过优化的缓冲系统中，可确保 DPPIV 和萤光素酶发挥活性。加入单溶液的 DPPIV-Glo™ 试剂，只需 " 加样 - 混合 - 检测 " 个步骤，DPPIV 即作用于底物，并通过萤光素酶反应产生 " 辉光型 " 发光信号。在这种均质的双酶偶联的反应中，该发光信号的强弱与 DPPIV 酶的活力成正比。该试剂盒专为检测纯化的酶制剂而设计。

• 简化的方法：均质的 " 加样 - 混合 - 检测 " 三个简单步骤使其更适于自动化操作。

• 更高的灵敏度：该方法比普通基于化学荧光的 DPPIV 检测法灵敏度更高，与化学荧光检测法相比，发光检测法避免了固有的背景荧光信号的干扰，使信号背景比更好。这种检测方法的线性范围超过了 DPPIV 浓度的三个数量级，可以检测到少于 1pg/ml的酶量。

• 更快地得到结果：信号只需在试剂加入 30 分钟后即可达到最强(和最高灵敏度 )，与化学荧光反应不同，发光信号不依赖于蛋白剪切产物的积累。

• 可以进行批处理：信号的稳定性使得检测板在较长时间后仍可进行检测。

• 储存条件：避光保存于 -20℃。

Cat.# G8632, G8641, G8642, G8351 供实验室用。96 孔板检测时，当每个孔使用的检测试剂为 100µl 时，Cat.# G8621, G8631, G8641, G8531(3 个系统中的每个系统 ) 分别提供足够进行 100 个孔的检测；Cat.# G8622, G8632, G8642, G8532(3 个系统中的每个系统 ) 分别提供足够进行 500 个孔的检测。384 孔板检测时，当每个孔使用的检测试剂为 25µl 时，Cat.# G8621, G8631, G8641, G8531(3 个系统中的每个系统 ) 分别提供足够进行 400 个孔的检测；Cat.# G8622, G8632, G8642, G8532(3 个系统中的每个系统 ) 分别提供足够进行2,000 个孔的检测。

Proteasome-Glo™ Assays (Proteasome-Glo™ 检测试剂盒 ) 是一种均质的发光检测方法，能够分别检测蛋白酶体相关的类胰凝乳蛋白酶、类胰蛋白酶和类 caspase 的蛋白酶活性，用于检测纯酶。26S 的蛋白酶体是一种存在于所有真核细胞中的 2.5MDa 的多蛋白复合体。Proteasome-Glo™ 检测试剂盒在缓冲液中提供可发光的蛋白酶体底物，该试剂经过了优化，使细胞通透性、蛋白酶体活性和萤光素酶活性均达到最佳。以“加样 - 混合 - 检测”的方式加入Proteasome-Glo™ 细胞学检测试剂，引发蛋白酶体剪切底物，并通过萤光素酶反应快速产生发光信号。

用于监测三种特异蛋白酶活性的发光前体底物包括：用于检测类胰凝乳蛋白酶活性的 Suc-LLVY- 氨基萤光素、用于检测类胰蛋白酶活性的 Z-LRR- 氨基萤光素以及用于检测类 caspase 活性的Z-nLPnLD- 氨基萤光素。每种发光底物都加入到经过优化的缓冲液中，使之更适于相应的蛋白酶体活性和萤光素酶活性。将试剂加入到包含蛋白酶体的测试样品中，就能剪切底物、释放萤光素，后者经萤光素酶的作用，产生 " 辉光型 " 发光信号，发光强度与酶的活性或抑制性相关。

Proteasome-Glo™ 3-Substrate System(Proteasome-GloTM 3底物系统 ) 由三种均质的发光检测试剂盒组成，用于检测纯酶。其中的任何一个试剂盒均可单独购买。

Proteasome-Glo™ 3-Substrate Cell-Based Assay System(Proteasome-Glo™ 3 底物细胞检测系统 ) 是由 3 个均质的生物发光检测系统构成，能够检测细胞培养物中 3 种与细胞蛋白酶体相关的蛋白水解活性 ( 这三种检测试剂盒均可单独购买 )。

• 方法经过简化：" 加样 - 混合 - 检测 " 操作程序最大程度地减少了手工处理步骤，并且使该试剂盒更适于自动化操作。

• 更快速地得到结果：在加入试剂 10-30 分钟后可达到最高灵敏度。

• 更高的灵敏度：发光检测模式避免了荧光方法所固有的背景信号，提供优良的信号 - 背景读数。该检测试剂盒可用于 384 孔板。

• 储存条件：储存于 -20℃。