【Promega】Lumit™ Assays 检测细胞因子 /HMGB1

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promega Lumit™ Assays 检测细胞因子 /HMGB1 W6110 W6112 Lumit™ Cytokine lmmunoassays

Lumit™ Assays 检测细胞因子 /HMGB1

描述和应用

预构建的 Lumitrm Cytokine/HMGB1 lmmunoassays 是简便快捷的定量检测系统，该系统使用平板，操作步仅需添加-读取即可实现检测。检测系统的良好检测灵敏度通过其较低的检测限(LOD)体现，同时检测系统的线性范围较宽可免去对样本进行稀释这一操作步骤。Lumitm 检测系统适用于低通量或高通量实验。

原理和工作流程

检测试剂盒中包含分析物特异性一抗(NanoBiT亚基 LgBiT和 SmBiT 标记)，分析物标准品和检测试剂。在存在细胞(选项 1)时或将样本转移至单独平板(选项2)时，对细胞培养物上清液中的分析物进行检测。两种抗体与分析物的结合促成 NanoBiT,萤光素酶的重构。加入检测试剂后，可在常规发光检测仪上读取并记录与分析物浓度水平成正比的明亮发光信号

检测原理

检测工作流程

检测特征

样本材料	含细胞的上清液转移上清液
样本体积	12.5~80ul
检测模式	直接检测模式 96 孔板 1384 孔板
实施	均质检测添加和读取模式
所需时间	≤70 分钟
多重检测选项	Caspase-Glo®1Inflammasome Assay

代表数据

HTS 兼容性验证

将人 PBMC 以 10000 个细胞/孔铺板于 384 孔板中，用细胞刺激混合物在最大或 70% 最大刺激水平下处理 24 小时。在每种条件下，加入试剂后测定了 94 份重复样本的发光信号。IL-2释放测定的 Z'因子显著大于 0.5，表明检测系统适合用于筛选用途。

药物诱导的免疫原性细胞死亡

用阿霉素处理小鼠 EL4 细胞 24 小时。使用 Lumit™ HMGB1 Immunoassay，在存在细胞(不进行转移)的情况下定量测定了上清液中的 HMGB1 水平.

IFN-γ(T细胞活化标志物)的检测

将纯化的 CD8+T细胞(效应细胞)与 Raji B细胞(靶细胞)合并，然后再加入 Blincyto®(一种 CD3 和 CD19 双特异性T细胞衔接体)的连续稀释液。在存在细胞(不进行转移)的情况下，使用 Lumit™ lFN-γ lmmunoassay 分析了效应细胞释放至细胞培养上清液中的 IFN-γ 水平。