【Promega】pGEM®-T Vector Systems
【Promega】pGEM®-T Vector Systems
说明
pGEM® -T 载体系统是克隆 PCR 产物的方便系统。pGEM®-T载体是通过 EcoRV 酶切 pGEM®-5Zf(+) 载体,并在两个 3' 末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM®-T 载体插入位点 3'-T 突出端可极大提高PCR 产物的连接效率,因为 3'-T 突出端可以防止载体的自身环化,并且为某些热稳定性聚合酶产生的 PCR 产物提供一个匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的 3' 端加上一个脱氧腺苷酸。
pGEM® -T 载体多克隆区 T 突出端的两侧均有 BstZI 酶切位点,使用 BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM® -T 载体系统 II 除了 pGEM® -T 载体系统 I 所有成分外,还包括 JM109 感受态细胞。
特点
• 快速连接:使用 2X 快速连接缓冲液 (2X Rapid Ligation Buffer)可以使连接反应在室温下 1 小时内完成。
• 蓝 / 白筛选:pGEM® -T 载体包含有 T7 和 SP6 RNA 聚合酶启动子,分别位于 β - 半乳糖苷酶的 α - 肽编码区内多克隆位点的两侧。α - 肽的插入失活允许在指示培养基上用颜色直接筛选重组克隆。
• f1 复制起始位点:可用于制备单链 DNA。
• 储存条件:感受态细胞储存于 -70℃;其它组分储存于 -20℃。
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