【Promega】ImProm-II™ Reverse Transcription System
可单独购买产品
说明
ImProm-II™ Reverse Transcription System(ImProm-II™ 逆转录系统 ) 可有效合成用于 PCR 扩增反应的 cDNA 第一条链。
ImProm-II™ 逆转录系统的组分可用于以总 RNA、poly(A)+ mRNA或合成的转录本 RNA 为模板进行逆转录。优化的反应缓冲液及强大的逆转录酶赋予 ImProm-II™ 逆转录系统较强的全长 cDNA 合成能力，可用于低丰度或较长的信使 RNA 的分析，并具有良好的重复性。
cDNA 合成条件既可单独应用，也可继续进行靶基因的特异扩增。可使用 Taq DNA 聚合酶从 1-20ml 逆转录反应产物中直接进行偶联或非偶联 PCR 反应。
特点
• 全长 RT-PCR：可逆转录长达 8.9kb 的 RNA 模板。
• 微阵列兼容性：cDNA 合成时，可掺入正常的、Cy® 3 修饰的、Cy® 5 修饰的及氨基 - 烯丙基修饰的核苷酸。
• 易于使用：试剂盒提供了进行逆转录反应的所有必要试剂。
• 可扩展和灵活性：从初始的逆转录反应中取出 1-20ml 产物可直接用于随后的 PCR 扩增，并且优化的反应缓冲液允许进行偶联的RT-PCR 反应。
• 通用：可与任何热稳定性 DNA 聚合酶配合使用。
• 可定制或批量订购：想要了解更多此产品的定制选项，请浏览：www.promega.com/myway/。
• 储存条件：储存于 -20℃。阳性对照 RNA 储存于 -70℃。
两步法 RT-PCR：采用 ImProm-II™ 逆转录系统，在一定温度范围内从 8.9kb 模板中合成全长 cDNA，而后选择性扩增 3' 末端序列。以 oligo(dT) 为引物，使用 ImPromII™ 逆转录系统将 8.9kb 的 mRNA 全部逆转录，才能扩增出 3' 末端的 940bp 序列。
用 1mg 或 100ng 的总 RNA 作为 RT-PCR 反应的模板。不加入逆转录酶的对照反应标示为 (-RT)。详细实验步骤请参照 ImProm-II™ 逆转录系统技术手册，#TM236。
荧光标记核苷酸的掺入研究。ImProm-II™ 逆转录系统可高效掺入 Cy® 3 和 Cy® 5 荧光核苷酸。用 1.2kb 卡那霉素转录本为模板，分别采用 ImProm-II™ 逆转录系统和SuperScript™ II 逆转录系统进行逆转录，比较荧光核苷酸的掺入效率。采用 FMBIO® II荧光显像仪只检测到一条荧光带。
采用 SuperScript™ II 逆转录系统和 ImProm-II™ 逆转录系统进行逆转录反应时，Cy®3 和 Cy®5 荧光核苷酸掺入效率比较。图中显示了 Cy®3 dUTP( 组 A) 和 Cy®5dUTP( 组 B) 的掺入结果，其中组 A 和组 B 与上图中的图 A 和图 B 相对应。
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