【Promega】脂代谢检测
Promega 脂质代谢检测提供了检测和定量甘油、甘油三酯、胆固醇和胆固醇酯的灵敏、简单的方法。这些检测方法可用于定量脂肪分解和脂肪生成以及其他生物过程。脂质代谢检测基于生物发光技术，适用于许多生物样品，包括单层或 3D 结构的培养细胞、组织、细胞培养基、血浆和血清。用于脂质代谢检测的细胞类型包括在单层和 3D 培养物中生长的肝细胞和脂肪细胞。该检测方案无需有机提取步骤，简化了样品制备步骤，同时线性范围宽，敏感度高，减少了所需的样品稀释次数，提升了辨别脂质代谢产物水平微小变化的定量能力。
脂质是什么 ?
不溶于水而能被乙醚、氯仿、苯等非极性有机溶剂抽提出的化合物。
脂类包括油脂（甘油三酯）和类脂（磷脂、固醇类）
脂类的作用是什么 ?
● 能源、存储
● 组成生物膜 ( 如磷脂、鞘脂和胆固醇 )
● 传递信息
脂质代谢的改变涉及到：
● 脂肪肝 - 肝脏内脂肪堆积 (NASH, NAFLD)
● 癌症—包括免疫细胞和癌细胞
● 代谢紊乱和肥胖
脂代谢检测系统基本介绍
生物发光法消除了比色法和荧光法所受到的信号干扰，且无需有机提取步骤，操作简单。更宽的线性范围，减少样品稀释次数，可鉴别脂代谢微小变化。
■ 产品应用
用于脂肪分解和生成的量化，检测代谢变化和细胞模型中胰岛素和胰岛素类似物的生物活性。
■ 样本类型
细胞裂解物、培养基、组织匀浆、血清，脂蛋白组分，3D 培养物。
■ 技术优势
• 灵敏度 (1 - 5pmole /sample)；
• 线性范围宽(0.1—80 μM)；
• 宽动态范围( 最大 S/B >100 倍 )；
• 适用于不同类型的样品；
• 兼容 96 孔和 384 孔板和标准读板仪，适合高通量检测。
■ 技术原理
应用：NAFLD & NASH 肝病研究
包括非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）在内的肝病是慢性疾病，没有有效的治疗方法。
为了支持研究肝病的研究人员，我们提供了简单可靠的方法来检测细胞代谢、氧化应激和炎症。我们的分析使用发光技术进行检测，灵敏且操作快速而简单。
■ 检测甘油三酯稳态和脂肪变性
NAFLD 的标志性病理是肝细胞中甘油三酯的积聚，也称为脂肪变性。过量的甘油三酯来自两个主要来源。首先，来自膳食脂质和脂肪组织的游离脂肪酸（FFA）通过脂肪生成转化为甘油三酯。第二，胰岛素抵抗促进新的脂肪生成，其中甘油三酯由碳水化合物合成。您可以使用 Triglyceride-Glo™ Assay 轻松检测脂肪变性和脂肪生成。
检测系统可用于多种样品类型，包括细胞裂解物、培养基、组织匀浆、血清和脂蛋白组分。简单、无需清洗的方案使用灵敏的生物发光检测，与染色、比色或荧光板检测相比，提供了更好的结果。代替繁琐的有机提取，使用快速洗涤剂裂解步骤来制备脂质样品。同样， Glycerol-Glo™ Assay 可用于检测脂肪分解。
BSA 结合的脂肪酸和脂蛋白通过脂肪生成刺激肝细胞内甘油三酯的积累。在这里，我们使用了 Triglyceride-Glo™ Assay 在几个治疗条件下和随着时间的推移，监测人体肝脏 3D 微组织的甘油三酯含量。结果表明， Triglyceride-Glo™ Assay 可用于监测细胞模型中脂肪变性的进展。
将 3D InSight™ 人肝微组织（InSphere 公司提供）在含有生理（LG/LI）或超生理（LG/HI）葡萄糖和胰岛素水平的无血清培养基中培养 3 天和 10 天，并补充与 BSA 结合的游离脂肪酸（FFA）或低密度脂蛋白血浆（LDL）。在 PBS 中洗涤微组织两次，并根据 Triglyceride-Glo™ 检测系统说明书检测甘油含量。这些数据由瑞士苏黎世 InSphere 公司提供。
■ 使用 NASH 细胞模型评估药物诱导毒性
Kermanizadeh 等人在这项研究中证明，预有疾病 (pre-existing disease) 在异源性肝损伤的加剧中至关重要。他们使用了 Triglyceride-Glo™ Assay 检测 3D 人类肝脏微组织中的脂质积聚，以及 CellTiter Glo® 2.0 监测活力。
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