【Merck】超滤法浓缩蛋白操作：Amicon® Ultra 4 超滤管

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Merck AC04310 AC06210 AC07610 Biomax GVWP06225 GVWP07625 HVLP06225 HVLP07625 LCC04310 LCC06210 LCC07610 PBCC04310 PBCC06210 PBCC07610 PBGC04310 PBGC06210 PBGC07610 PBHK04310 PBHK06210 PBHK07610 PBMK04310 PBMK06210 PBMK07610 PBQK04310 PBQK06210 PBQK07610 P

需要的耗材与设备

• Amicon® Ultra 4超滤管

• 带有能容纳15ml锥底试管（17mmx124mm）的摆桶或定角转子的离心机，首选摆桶转子。

操作指南

一、预清洗

Amicon® Ultra 4超滤管的超滤膜含有痕量甘油。如果担心干扰后续分析，可用缓冲液或Milli-Q® 水进行预清洗。如果干扰仍然存在，可用0.1N NaOH清洗，再用缓冲液或Milli-Q® 水清洗并甩干。

▲tips：Amicon® Ultra超滤离心管中的滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。

二、大分子溶液浓缩

1. 向Amicon® Ultra超滤离心管加入不超过4mL的样本（如果使用23°定角转子，则为3.5mL）。

2. 将盖好盖子的超滤离心管放入离心转子（最好为摆桶转子）中，用一个类似的超滤管平衡。

3.如果使用摆桶转子，以最大4,000xg离心约10–40分钟。如果使用定角转子，使超滤内管的膜面朝上，对于Amicon®Ultra 3K、10K、30K和50K的超滤管以最大7,500xg离心约10–40分钟；对于Amicon® Ultra 100K的超滤管以最大5,000xg离心约10–20分钟。

4.回收浓缩产物时将移液管（枪头）插入超滤离心管内管，左右移动着吸取样本，以确保完全回收。滤过液可以保存在离心外管中。

▲tips：要想达到理想回收率，离心后请立即取走浓缩后样本。

▲tips：典型的滤出液体积与离心时间(摆桶转子)

离心条件:4,000xg,室温,4mL起始体积

操作样品:3K和5K超滤管用的样品是细胞色素c、30K和50K

超滤管用的样品是BSA,100K超滤管用的样品是IgG.

默克生命科学提供行业标杆超滤产品

一、常规蛋白浓缩脱盐Amicon® Ultra超滤管

默克生命科学旗下Millipore 子品牌的Amicon® Ultra离心式超滤管因其完美的设计一经推出即成为生物样品操作的行业标杆产品。不论是蛋白、核酸、病毒或颗粒物，抑或低浓度样品或宝贵的活性样品，Amicon® Ultra都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。

独有Ultracel®超滤膜是品质保证的核心

孔径精准，产品得率高，操作速度快

蛋白非特异吸附最低

不用胶水密封，避免对样品的污染

反转回收，提高得率

●配有额外的外管用于样品回收和保存AU0.5 和 AU2

●对于小体积样品大幅提高回收率

●Centricon® Plus-70mL 超滤管也采用反转离心提高

样品得率

更多特别的设计，得率大于90%

●双竖膜设计，膜面积更大，切向流减少堵塞，操作更快速

●合理的死体积设计，避免样品离干，便于估计和控制样品浓缩倍数

●内外管膜聚丙烯材质进一步降低非特异性吸附损耗

●一体化结构设计紧凑精巧，避免渗漏，宝贵样品操作更安心

产品描述	截留分子量	包装	目录号
Amicon Ultra 0.5mL	3kDa	500	UFC5003BK
Amicon Ultra 0.5mL	3kDa	96	UFC500396
Amicon Ultra 0.5mL	10kDa	500	UFC5010BK
Amicon Ultra 0.5mL	10kDa	96	UFC501096
Amicon Ultra 0.5mL	30kDa	500	UFC5030BK
Amicon Ultra 0.5mL	30kDa	96	UFC503096
Amicon Ultra 0.5mL	50kDa	500	UFC5050BK
Amicon Ultra 0.5mL	50kDa	96	UFC505096
Amicon Ultra 0.5mL	100kDa	500	UFC5100BK
Amicon Ultra 0.5mL	100kDa	96	UFC510096
Amicon Ultra 2mL	3kDa	24	UFC200324
Amicon Ultra 2mL	10kDa	24	UFC201024
Amicon Ultra 2mL	30kDa	24	UFC203024
Amicon Ultra 2mL	50kDa	24	UFC205024
Amicon Ultra 2mL	100kDa	24	UFC210024
Amicon Ultra 4mL	3kDa	96	UFC800396
Amicon Ultra 4mL	10kDa	96	UFC801096
Amicon Ultra 4mL	30kDa	96	UFC803096
Amicon Ultra 4mL	50kDa	96	UFC805096
Amicon Ultra 4mL	100kDa	96	UFC810096
Amicon Ultra 15mL	3kDa	96	UFC900396
Amicon Ultra 15mL	10kDa	96	UFC901096
Amicon Ultra 15mL	30kDa	96	UFC903096
Amicon Ultra 15mL	50kDa	96	UFC905096
Amicon Ultra 15mL	100kDa	96	UFC910096
* AU0.5/AU4/AU15 还提供规格为 8 个 / 包和 24 个 / 包的选择。

二、大体积离心式浓缩脱盐

Centricon® Plus-70离心浓缩管

在病毒、外泌体和蛋白结构样品制备时，样品体积往往超过几十毫升，这些情况下Amicon® 搅拌式超滤杯是比较经济而灵活的选择：

●低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计，25 分钟内将样品浓缩至 350μL

●使体积设计和反转离心回收使得率超过 90%

●四种截留分子量选择

产品描述	截留分子量	包装	目录号
Centricon® Plus-70 3K	3kDa	8	UFC700308
Centricon® Plus-70 10K	10kDa	8	UFC701008
Centricon® Plus-70 30K	30kDa	8	UFC703008
Centricon® Plus-70 100K	100kDa	8	UFC710008

三、大体积温和浓缩

Amicon® 搅拌式超滤杯

在病毒、外泌体和蛋白结构样品制备时，样品体积往往超过几十毫升，这些情况下Amicon® 搅拌式超滤杯是比较经济而灵活的选择：

●兼顾样品活性和操作速度：氮气加压温和磁力搅拌式操作

●选择灵活、配套齐全：可根据需要选配不同孔径的超滤膜（再生纤维素膜/PES 膜）和微滤膜（PVDF 膜）

●三种体积供选择

	8050型	8200型	8400型
目录号	UFSC05001	UFSC20001	UFSC40001
最大处理量，mL	50	200	400
最小处理量，mL	2.5	5	10
滤膜直径，mm	44.5	63.5	76
有效膜面积，cm2	13.4	28.7	41.8
滞留体积，mL	0.5	1.2	1.5

四、超滤膜片（10片/盒）

	膜片直径 (mm)*
膜材质	NMWL (K)	44.5 mm	63.5 mm	76 mm
Ultracel® 再生纤维素膜	1	PLAC04310	PLAC06210	PLAC07610
	3	PLBC04310	PLBC06210	PLBC07610
	5	PLCC04310	PLCC06210	PLCC07610
	10	PLGC04310	PLGC06210	PLGC07610
	30	PLTK04310	PLTK06210	PLTK07610
	100	PLHK04310	PLHK06210	PLHK07610
Biomax® PES膜	5	PBCC04310	PBCC06210	PBCC07610
	10	PBGC04310	PBGC06210	PBGC07610
	30	PBTK04310	PBTK06210	PBTK07610
	50	PBQK04310	PBQK06210	PBOK07610
	100	PBHK04310	PBHK06210	PBHK07610
	300	PBMK04310	PBMK06210	PBMK07610
	500	PBVK04310	PBVK06210	PBVK07610

五、微滤膜片（25片/盒）

Durapore® PVDF膜

膜孔径	膜片直径 (mm)	目录号
0.1 µm	63.5	VVLP06225
0.1 µm	76	VVLPO7625
0.22 µm	63.5	GVWP06225
0.22 µm	76	GVWP07625
0.45 µm	63.5	HVLP06225
0.45 µm	76	HVLP07625