【Merck】蛋白质的换液：超滤法
蛋白质溶液换液的主要目的是除盐，把小分子和蛋白分子分离开。常用的方法有超滤法、透析法和凝胶过滤层析等。
下面总结了几种换液/脱盐方法的原理和特点：
脱盐方法 | 原理 | 特点 | 主要应用 |
超滤 | 主要根据分子大小不同而进行与小分子的分离 | 操作条件温和，蛋白不易失活，操作简单、快速 | 酶、核酸和病毒样品的快速浓缩、换液 |
透析 | 蛋白不能透过半透膜，而小分子经扩散透出膜外与周围缓冲液进行溶质交换直至平衡 | 费用低，操作费时，对样品稀释度大 | 蛋白复性，敏感样品的换液 |
凝胶过滤层析 | 根据分子大小进行分离 | 回收率高，重复性好，对样品的稀释较大，上样量较小，操作费时 | 小量蛋白处理 |
下面具体介绍以超滤方法实现蛋白换液/脱盐的操作：
Amicon® Ultra 0.5 超滤管
一、需要的耗材及设备
• Amicon® Ultra 0.5超滤管
• 可容纳1.5mL微量离心管的固定角度转子离心机
二、操作指南
浓缩样本，弃去滤出液，然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂，恢复到样本原先的体积。“洗出”的过程可反复进行，直到杂质的浓度被充分降低。请参看下面的例子。
Amicon® Ultra 4 超滤管
一、需要的耗材及设备
• Amicon® Ultra 4超滤管
• 带有能容纳15ml锥底试管（17mmx124mm）的摆桶或定角转子的离心机，首选摆桶转子
二、操作指南
浓缩样本，弃去滤出液，然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂，恢复到样本原先的体积。“洗出”的过程可反复进行，直到杂质的浓度被充分降低。请参看下面的例子。
Amicon® Ultra 15 超滤管
一、需要的耗材及设备
• Amicon® Ultra 15超滤管
• 带有能容纳50mL试管的摆桶或定角转子的离心机
二、操作指南
浓缩样本，弃去滤出液，然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂，恢复到样本原先的体积。“洗出”的过程可反复进行，直到杂质的浓度被充分降低。请参看下面的例子。
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