【MediLumine】Vascupaint™ 造影剂操作指南

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Protocol of Vascupaint Silicone Rubber Injection Compounds

Vascupaint™ 无铅硅胶注射剂用于填充并使微血管结构不透明化，适用于离体三维成像，包括微CT、解剖或明场显微镜，以及短波红外荧光成像。该注射剂提供两种颜色：黄色（产品编号 MDL-121）适用于微CT成像，绿色（产品编号 MDL-122）适用于近红外或短波红外荧光成像，另有透明色（产品编号 MDL-123）可供定制配制。其他颜色可根据需求提供。

与传统含铅注射剂相比，Vascupaint™ 黏度更低，便于灌注非存活生物体及人体器官，用于离体三维血管铸型分析。

特点与优势

黄色产品中的铋纳米颗粒具有X射线衰减特性，可实现高分辨率微CT成像
黄色产品中铋颗粒粒径小于750纳米，确保充分填充毛细血管和微血管系统
混合物低黏度特性允许在生理压力下灌注非存活生物体，并完全填充微血管
催化剂为明确介质，利用水分子驱动单体交联。催化剂瓶使用前无需摇晃，交联剂与催化剂无沉降现象，且催化剂瓶无需预先摇匀

应用领域

血管腐蚀铸型、血管生成成像、缺血与肿瘤中血管容积量化、血管形态计量学的微CT分析、器官血管结构评估、教学辅助、手术技术中的微循环可视化

Vascupaint 套件组成

1瓶硅胶（绿色、黄色、青柠色、蓝色、红色或透明），200毫升
1瓶稀释剂，200毫升
1瓶催化剂，20毫升

储存条件

本套件所有组分应室温储存，自生产日期起有效期一年

产品安全与操作

本产品仅用于研发用途，不适用于药品、家庭或其他用途。请查阅材料安全数据表（MSDS）了解正确的安全操作流程。

温馨提示

1.建议部分组织灌输时可先用伊文思蓝试剂或者相关试剂进行灌注技术模拟(特别重要);

2.血管灌注需要经过预实验摸索条件(不同的组织以及不同的成像方法所要求达到理想的效果所使用灌注细节不同)，经灌注剂使用方法和技术磨合以达到最优效果;

3.MDL-121套装可灌注大约15~20只大鼠;

4.对于灌注后组织进行后续ICC/IHIC以及HE染色实验，要想有更好的效果也需要进行条件摸索;

5.如果需要灌注至微循环体系，要注意灌注剂的时间窗口期，防止凝固

产品使用初始方案

硅胶与稀释剂混合母液配制方法

1. 取20毫升 Vascupaint 加入50毫升锥形管（此步骤请勿使用移液器）

2. 向同一管中加入25毫升稀释剂

3. 轻轻颠倒混匀后储存备用

NOTE: 母液中可能出现颜料轻微沉降，可通过轻轻颠倒瓶身数次消除。轻柔颠倒后颜料可在溶液中悬浮数小时。

操作流程示例（小鼠灌注推荐方案）

1. 轻轻颠倒/摇晃母液瓶。

2. 取9毫升母液加入14毫升锥形管或培养皿，用于混合0.45毫升催化剂。

3. 将注射针头尖端剪钝，经左心室插入心脏并直达主动脉。切开右心房使血液及造影剂流出循环系统（也可切开肝脏边缘代替心房，减缓造影剂流出速度。部分用户发现结扎非必要分支（如肾脏灌注时结扎肾动脉下方腹主动脉、后肢灌注时结扎肠系膜血管、脑灌注时结扎左心室）可提升灌注质量，详见示例视频：https://youtu.be/Icm1OG-vUl4）

4. 若步骤2未进行肝素腹腔注射，先灌注肝素化PBS（5毫升），再换用福尔马林注射器（5毫升）进行固定。

5. 向培养皿中的母液加入0.45毫升（5%）催化剂，用移液器反复吹吸混匀后转入注射器

6. 固定完成后换用 Vascupaint 混合液注射器。注射前用止血钳夹住心脏固定针头，并涂抹强力胶确保钳夹稳固。注入混合物时应感受到反向压力，此举可将针头固定于主动脉，最大限度避免混合液从心脏渗漏（可配合灌注泵缓慢给药防止渗漏或钳夹松脱）。注意：更换注射器时避免针尖产生气泡。

7. 将小鼠置于冰箱静置过夜。脑灌注实验需将小鼠倒置存放于4℃环境过夜。

8. 次日体内 Vascupaint 应完全固化，可小心取出器官。脑部处理需剥离头部皮肤暴露颅骨。器官可通过标准组织消化技术进一步处理，用于解剖或明场显微镜分析（此应用可能需要增加催化剂用量以确保充分固化）。完整器官可直接进行微CT成像分析（黄色版本），表面血管可通过肉眼观察或显微镜评估灌注效果。