【MediLumine】Vascupaint™ 造影剂

Vascupaint™ 是一款专为解剖教学、研究和标本保存而设计的高品质硅橡胶注射填充剂。是传统含铅注射化合物的低粘度替代品，使其更容易灌注非存活生物体以及用于体外3D血管铸型分析的人体器官。本品混合后注入血管系统，可在室温下固化成型，完美复制并凸显动、静脉及微细血管的解剖结构，可应用于血管腐蚀铸型、血管生成成像、缺血和肿瘤中血管体积的量化、血管形态学的显微CT分析、器官的血管结构评估、手术技术的微循环可视化以及教学辅助。

• Vascupaint™ 无铅硅胶注射剂用于填充并使微血管结构不透明化，适用于离体三维成像，包括微CT、解剖或明场显微镜，以及短波红外荧光成像。

• 无铅配方：采用先进的环保配方，替代传统含铅填充剂，避免了对使用者和环境的潜在危害，更符合现代实验室安全标准。

• 优异的灌注效果：低粘度液体配方，流动性好，能够灌注至最微小的毛细血管，清晰再现复杂的血管网络全貌，是解剖学和形态学研究的理想工具。

• 色彩鲜明、选择多样：提供多种辐射不透色（如红、黄、绿、蓝、青柠）及透明选项，并可依客户需求定制特殊颜色。色彩饱满持久，便于区分动静脉系统，制作出极具教学与展示价值的标本。（黄色（产品编号 MDL-121）适用于微CT成像，绿色（产品编号 MDL-122）适用于近红外或短波红外荧光成像，另有透明色（产品编号 MDL-123）可供定制配制。其他颜色可根据需求提供。）

套件组成：1瓶硅胶(绿色、黄色、青柠色、蓝色、红色或透明)，200mL；1瓶稀释剂，200mL；1瓶催化剂，20mL

Vasupaint™ 硅胶注射化合物，产品中铋纳米颗粒的X射线衰减特性可实现离体高分辨率显微CT成像。

• Vasupaint™黄色产品中铋颗粒小于750纳米的粒径足以填充毛细血管和微血管。

• 混合物的低粘度允许在生理压力下灌注非存活生物体，并完全填充微血管。

• 催化剂是一种确定的介质，利用水分子驱动单体交联。催化剂瓶在使用前无需摇晃，且交联剂和催化剂不会沉淀。

Vascupaint™ 无铅硅胶注射复合物用于填充并使非存活动物的微血管结构及其他腔隙不透明化，适用于酒精组织透明化后的微CT成像或明场显微镜视觉检查。

注射后，通过混合试剂盒组分获得的 Vascupaint 混合物会经历固化过程，形成精确的血管系统三维铸型，为分析提供详细表征。该产品提供多种辐射不透色及透明选项，Vascupaint 实现了可视化上的灵活性。其无铅成分确保了安全性与合规性，同时提供完全填充和最小收缩，从而获得生动、光学透明的标本，非常适用于详细的微循环研究。颜色的多样性进一步有助于勾勒循环树，便于显微镜检查和摄影图示。

Napieczyńska H et al., 2023

单只大鼠不同器官内血管网络的显微CT图像。 顶部起第二和第三组分别显示了矢状面和冠状面切片。底部小组中描绘了彩色编码的血管直径。

1.血管灌注实验评估血脑屏障完整性及血管网络

Genet N et al., 2023

为评估脑部微血管系统的变化，按照制造商的说明（MediLumine，货号MDL-122）向小鼠注射了4mL绿色Vascupaint试剂。注射后，取脑组织并在3.7%甲醛中过夜后固定。随后，依次用30%、60%和100%甲醇分别脱水24小时。脱水完成后，使用苯甲酸苄酯和苯甲醇按1:1比例配制的澄清液处理脑组织48小时，最终使用尼康SMZ-745T三目4K数码立体显微镜进行成像。

2．利用高分辨率成像技术和新型灌注铸型剂来量化啮齿类动物脑卒中前后神经血管网络参数（如血管体积和连通性）变化

Quantification-of-Neurovasculature-Changes-in-a-Post-Hemorrhagic-Stroke-Animal-Model.pdf

地址：https://medilumine.com/wp-content/uploads/2024/10/Quantification-of-Neurovasculature-Changes-in-a-Post-Hemorrhagic-Stroke-Animal-Model.pdf

动物模型： 使用自发性高血压易卒中大鼠（SHRsp），该模型卒中发生率约80%，与人类出血性卒中主要可控因素（未控制的高血压）具有可转化性。

灌注与成像流程：

① 使用5mg:1mg/kg氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉大鼠。

② 通过股动脉输注伊文思蓝（EB，3mg/kg），循环20分钟。

③ 打开胸腔；钳夹腹主动脉和下腔静脉。

④ 使用灌注泵（MasterFlex L/S Standard Drive）和翼状输液器，以1.2ml/min的速度经心脏灌注温肝素化1%磷酸盐缓冲盐水（PBS）。

⑤ 以0.9ml/min的速度灌注8ml 4%多聚甲醛（PFA）的PBS溶液，以固定前半身。

⑥ 使用6ml铋组分/5ml稀释剂/0.25ml催化剂制备Vascupaint™（VP），并通过主动脉弓以1.5ml/min的速度灌注，直至在关键指示区域首次观察到Vascupaint™（约30秒，见图3）。随后将速度降至0.5ml/min。

⑦ 观察到右心房回流，确认灌注回路完成。

⑧ 采样前将肉体悬挂冷藏48小时。

⑨ 样品保存在4°C的10%缓冲福尔马林磷酸盐中，直至进行micro-CT扫描。

⑩ 通过Micro-CT和SkyScan 1176软件进行分析使用30ms的曝光时间，对整个大脑进行180°扫描，旋转步长为0.5度（每半度平均3次投影）。

数据分析： 在脑卒中常见部位（大脑中动脉区域）分析感兴趣区域，评估血管体积百分比和欧拉数（连通性）等参数。

3．成年小鼠膝关节血管三维成像（Vascupaint灌注和微CT成像）

Ishola AO et al., 2023

使用iDISCO+清洗的凝集素血管标记揭示了小鼠后肢血管的更详细视图，优于对比辅助微CT。（A,B）小鼠后肢在灌注Vascupaint对比剂后获得的代表性微CT图像的前视图，以及灌注了凝集素-649并使用iDISCO+清洗的小鼠后肢的光片图像。微CT图像中的骨骼伪彩色为白色，而微CT和光片面板中的血管根据血管直径进行着色（与面板E和F右侧对应的血管直径键）。 （C,D）相同样本的内侧视图；（E,F）外侧视图。（G）微CT和LSFM成像样本中不同直径血管的频率定量。（H）微CT和LSFM成像样本之间相对样本体积的血管体积差异的定量（计算为血管体积比率（%）=（血管体积 - 样本体积）x 100%）。F=股骨；Fi=腓骨；P=髌骨；T=胫骨；IMGA=下内侧膝动脉；ILGA=下外侧膝动脉；PA=腘动脉；SMGA=上内侧膝动脉；SLGA=上外侧膝动脉；比例尺=500 µm。

灌注前准备：

成年C57BL/6雄性和雌性小鼠使用汽化异氟烷麻醉，直到对伤害性刺激无反应。之后，打开胸腔，反射肋骨笼，并打开右心房。然后，通过左心室经心脏灌注，使用钝头25号注射器（BD PrecisionGlide, #305122）灌注8 mL温热的1x PBS / 20 U/mL肝素（Mckesson, #63739092025），接着灌注8 mL 10%中性缓冲福尔马林（Leica, #3800598），然后灌注1 mL Vascupaint™（MediLumine Inc, MDL-121）。

Vascupaint™的制备方法如下：

1 mL硅胶，2 mL稀释剂，和40 μL催化剂。第二天，从髋关节附近移除腿部，然后去除皮肤和毛发。后肢随后嵌入1%低熔点琼脂糖（在ddH2O中）于5 mL塑料小瓶（Axygen Scientific, ST-5ML）中，以防止成像过程中样本移动，并防止组织因脱水而收缩。

4．利用血管对比灌注技术进行高分辨率离体微CT成像，以可视化动脉血管系统

Sharina et al., 2025

小鼠经心脏灌注Vascupaint后的微CT成像，以可视化动脉血管系统。白色虚线圆圈指示了超声探头瞄准的区域。OphA表示眼动脉从视神经管中发出。（图C）

5．利用血管灌注技术，通过活体显微镜成像以可视化大脑血管网络

Shaohua Qi et al., 2023

DiI染色显示了XY*小鼠的Willis环解剖结构以及大脑前动脉、大脑中动脉和大脑后动脉之间的吻合线。红线表示吻合线，数字1、2、3、4、5表示中线上五个区域，通过它们测量了左右半球两条吻合线之间的距离。

重要提示：操作前请穿戴适当的个人防护装备（如实验服、手套、护目镜），并在通风良好的环境下进行。

① 将20 mL黄色硅胶分散液加入50锥形管中。请勿在此步骤使用移液器。

② 向同一管中加入25mL稀释剂

③ 轻轻颠倒混匀，储存备用。

使用预配硅胶稀释剂储备液注意事项：储备液中可能出现颜料的轻“软沉淀”轻轻颠倒瓶子数次即可使其重新分散。经此操作后，颜料可在溶液中悬浮数小时。

灌注非存活生物体混合比例可根据具体应用稍作调整。常用的一个方案示例为：取9 mL储备液至14 mL锥形管或培养皿中，加入5%（0.45mL）催化剂混合使用。

NOTE：调整黄色硅胶与稀释剂的比例可改变黄色硅胶的对比增强效果。例如，可尝试将4 mL黄色硅胶与4 mL稀释剂混合（而非与5 mL稀释剂混合）。混合后25分钟粘度开始上升，90分钟后开始硬化。如需提高组织透明应用所需硅胶硬度，可增加催化剂用量至硅胶/稀释剂混合物体积的5%。

① 轻轻颠倒和/或摇晃储备溶液瓶。

② 将9 mL储备溶液加入14 mL锥形管或培养皿中，用于混合0.45 mL催化剂。

③ 在插入心脏前，剪断针头尖端使其变钝。将注射器针头通过左心室插入心脏，并一直向上进入主动脉。切开右心房，使血液和造影剂流出循环系统。也可以切开肝脏边缘而不是心房，以确保造影剂流出速度较慢。

NOTE:一些用户发现，夹闭不需要的分支（例如，进行肾脏灌注时夹闭肾动脉以下的腹主动脉，灌注后肢时夹闭肠系膜血管，灌注大脑时夹闭左心室）可以提高灌注质量。请参阅此过程的示例视频。参考：https://youtu.be/lcm1OG-vUI4

④ 如果在步骤②中未进行肝素腹腔注射，则首先用含肝素的PBS（5mL）灌注，然后切换到已装有福尔马林（5 mL）用于固定的注射器。

⑤ 向装有储备溶液的培养皿中加入0.45 mL（5%）催化剂，并用移液器抽吸混合数次。将混合物转移至注射器。

⑥ 固定后，切换到装有Vascupaint™混合物的注射器。在注射Vascupaint™之前，用止血钳夹住心脏以固定针头位置，并添加强力胶以确保夹子固定到位，并且在将混合物注入生物体时能感受到背压。通过这样做，针头将固定在主动脉中，Vascupaint™混合物从心脏泄漏的情况将最小化，甚至完全避免。可以使用灌注泵缓慢注射Vascupaint™混合物，以避免任何泄漏或止血钳松动。注意：切换注射器时，避免在针头尖端产生气泡。

⑦ 将小鼠置于冰箱中过夜。对于脑灌注程序，将小鼠倒置于4℃冰箱中过夜。

⑧ 第二天，小鼠体内的Vascupaint™应已硬化，可小心取出器官。对于脑部程序，取下头部并暴露头骨。可以使用标准的组织消化技术进一步处理器官，以便用解剖显微镜或明场显微镜进行分析（*此应用可能需要增加催化剂的用量以确保Vascupaint™适当硬化）。完整的器官可用于黄色版本Vascupaint™的显微CT成像分析，并且可以通过目视检查或显微镜评估表面血管以确定灌注是否成功。

重要安全须知：本产品仅限专业人员在专业场景下用于预定用途。操作者须具备相关的解剖学知识和实验室技能。使用者应自行负责确保其操作符合所在地的所有安全与环保规定。本产品仅供研发使用，不得用于药物、家用或其他用途。

1．储存条件：未混合的组分应密封储存于阴凉、干燥、通风处，避免阳光直射和高温。远离火源、热源及氧化剂。

2．保质期：在规定的储存条件下，自生产之日起，保质期通常为 12个月。请检查产品包装上的具体有效期，切勿使用过期产品。

3．安全警告：

① 本产品为化学制剂，不可内服。

② 操作时避免皮肤直接接触。如不慎接触皮肤，请立即用肥皂和清水冲洗至少15分钟。如接触眼睛，立即用大量清水冲洗并寻求医疗帮助。

③ 固化前，混合物的蒸汽可能对呼吸道有轻微刺激性，请确保工作环境通风良好。

④ 固化后的硅橡胶材料为惰性固体，可按一般固体废弃物处理。未固化的液体材料及其废弃物，请根据当地环保法规进行处置。

1．医学院校、医疗机构的人体或动物血管解剖教学标本制作。

2． 解剖学、生理学及病理学的科研项目，用于血管三维结构研究。

3． 法医鉴定中的血管损伤分析。

4．生物标本馆或博物馆中具有展示价值的血管铸型标本制作。

5． 医疗器械（如支架、栓塞剂）体外模拟测试的血管模型制作。

产品名称：Vascupaint Silicone Rubber Injection Compounds (Lead Free)

供应商：MediLumine

声明：本说明书基于产品通用信息编制，内容仅供参考。产品规格、性能参数及安全信息可能更新，请务必以您所购产品实际附带的最新官方说明文件为准。对于特殊应用需求，建议直接联系供应商获取技术支持。

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