【Corning】354230 产品使用说明

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Corning 细胞外基质 ECM 生物涂层 Biological Coatings Matrigel Matrix Cell-Tak 细胞和组织粘附剂产品胶原蛋白 Collagen 层粘连蛋白 Laminin PuraMatrix BioCoat Poly-D-Lysine Fibronectin Synthemax vitronectin substrate 354230

Corning® Matrigel® Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix, LDEV-free

（354230）

Corning Matrigel Matrix GFR是为那些需要比Corning Matrigel Matrix纯化更高和表征更详细的重组基底膜制备而开发的。用于制备该产品的方法有效地降低了各种生长因子的水平（除了可能与胶原IV结合的TGF-β以及在潜在形式下与净化过程中的主要成分分离的情况）。在该过程中，主要成分（层粘连蛋白、胶原IV和接触蛋白）得到保留，而硫酸肝素蛋白多糖的水平降低了40-50%。下表显示了Corning Matrigel Matrix和一批典型的Corning Matrigel Matrix GFR之间的生长因子值的比较。

应用：

●细胞生长和分化

● 代谢/毒性学研究

●侵袭性分析

●体外和体内血管生成分析

●体内血管生成研究和免疫抑制小鼠肿瘤增长

表 1 354230产品信息

解冻方法

将Thaw Corning Matrigel Matrix GFR的小瓶置于4°C的冰箱靠后的位置，过夜，以解冻。解冻后，轻轻摇动瓶子以确保物质均匀分散。始终将Corning Matrigel Matrix GFR保持在冰上。

使用无菌技术处理。将解冻的Corning Matrigel Matrix GFR小瓶放置在无菌区域，喷洒70%乙醇在瓶盖上，并晾干。可以使用预冷的移液管轻轻吸取Corning Matrigel Matrix GFR以确保均匀性。将Corning Matrigel Matrix GFR分装到管中，当Corning Matrigel Matrix GFR堵塞移液枪头端和/或导致移液管测量不准确时，更换移液管头。如果将凝胶状的Corning Matrigel Matrix GFR放置在4°C的冰上24-48小时，可以重新液化。

可以将Corning Matrigel Matrix GFR作为薄凝胶层（0.5 mm）使用，细胞可在其上培养。也可以在Corning Matrigel Matrix GFR内培养细胞，使用1 mm的层厚。过度稀释将导致薄而非凝胶化的蛋白质层。这可能对细胞附着有用，但在分化研究中可能不太有效。

涂层步骤

Corning Matrigel Matrix GFR可以以几种方式使用。薄凝胶方法适用于将细胞放置在凝胶上方，厚凝胶方法允许在三维基质中培养细胞，而薄涂层方法（无凝胶）则提供了一个复杂的蛋白质层，供细胞在其上生长。根据希望实现的最终结果（细胞生长、附着或分化），选择适合的方法。

注意：Corning Matrigel Matrix产品的蛋白质浓度根据特定批次可以在分析证书上找到。为了获得一致的结果，请根据所需的具体蛋白质浓度（mg/mL）稀释Corning Matrigel Matrix产品。为了保持凝胶的一致性，建议不要将Corning Matrigel Matrix稀释至少于3 mg/mL。使用冰冷的无血清培养基稀释Corning Matrigel Matrix。通过上下移液或在冰上旋转瓶子进行混合。

薄凝胶方法：

根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix GFR。使用预冷的移液管将Corning Matrigel Matrix GFR混合均匀。

● 将培养板放在冰上，每平方厘米的生长表面上加入50 µl的Corning Matrigel Matrix GFR。

●将培养板放置在37°C的孵化箱中，孵育30分钟。

●如果需要，在使用前将未结合的物质抽取，并使用无血清培养基轻轻冲洗（确保移液管的尖端不刮伤涂层表面）便可使用。

厚凝胶方法：

● 根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix GFR。使用预冷的移液管将Corning Matrigel Matrix GFR混合均匀。

●将培养板放在冰上。将细胞加入到Corning Matrigel Matrix GFR中，并使用预冷的移液管悬浮细胞。每平方厘米的生长表面上加入150-200 µl的Corning Matrigel Matrix GFR。

● 将培养板放置在37°C的孵化箱中，孵育30分钟。现在可以添加培养基。细胞也可以在这个凝胶上方培养。

薄涂层方法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix GFR。使用预冷的移液管将Corning Matrigel Matrix GFR混合均匀。

●使用无血清培养基将Corning Matrigel Matrix GFR稀释至所需浓度。应提前进行预实验以确定适用的最佳涂层浓度。

●将稀释后的Corning Matrigel Matrix GFR加入要涂层的容器中。数量应足够覆盖整个生长表面。在室温下孵育一小时。

●抽取未结合的物质，并使用无血清培养基轻轻冲洗便可以使用。

细胞回收

使用Corning Cell Recovery Solution（Cat 354253）可以在冰上7小时内降解Corning Matrigel Matrix GFR，从而实现对生长在上面的细胞的最高效回收，或者使用Corning Dispase（Cat 354235），这是一种金属酶，可以温和地释放细胞，从而实现连续培养。

其他细胞品类