【Corning】356234 产品使用说明

基底膜是位于体内细胞下方的薄的细胞基质。Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix, LDEV-free是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)小鼠肉瘤中提取的可溶性基底膜制备物，该肿瘤富含细胞外基质蛋白。其主要成分是层粘连素(laminin)，其次是IV型胶原(collagen IV)、肝素硫酸蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycans)、结合蛋白/网素(entactin/nidogen)。Corning Matrigel Matrix GFR Phenol Red Free还含有TGF-β、表皮生长因子(epidermal growth factor)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor)、组织纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator)等自然存在于EHS肿瘤中的生长因子。Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix, LDEV-free对于正常和转化的依赖固定基底的上皮样细胞的附着和分化都有效。其中包括神经元、肝细胞、Sertoli细胞、鸡晶状体和血管内皮细胞等。Corning Matrigel Matrix GFR Phenol Red Free会影响成年大鼠肝细胞、血管内皮细胞以及小鼠和人类乳腺上皮细胞的基因表达。它是几种肿瘤细胞侵袭试验的基础，也能支持体内外周神经再生，以及研究血管生成所需的基质。Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix, LDEV-free还支持免疫抑制小鼠体内人类肿瘤的扩增。它可用于移植未分选的乳腺细胞，以及嵌入在Corning Matrigel中的分选上皮亚群体。该基质还被用作癌症干细胞模型，并显示能增强体内肿瘤生长速率。

应用：

●细胞生长和分化

●代谢/毒理学研究

●侵袭性测定

●体外和体内血管生成测定

● 体内血管生成研究和免疫抑制小鼠肿瘤扩增

表 1  356234 产品信息

Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix和所有与之接触的培养器皿或培养基都必须预先冷藏/冷冻，因为Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix在10°C以上会开始凝胶。始终将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix保持在冰上。

将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix的小瓶浸入冰中并放入4°C的冰箱的后部，过夜解冻。一旦解冻，轻轻摇晃瓶子以确保物质均匀分散。始终将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix保持在冰上。使用无菌技术处理。将解冻的小瓶放在无菌区域，喷洒70％乙醇于瓶盖上，并晾干。

可以使用预先冷却的移液管轻轻移液Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix，以确保均匀性。将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix分装到管中，当堵塞尖端或导致移液管测量不准确时，请更换移液管头。如果将凝胶状的Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix放置在4°C的冰上24-48小时，可以重新液化。

可以将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix用作薄凝胶层（0.5 mm），在其上播种细胞。细胞也可以在Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix内培养，使用1 mm的层厚。过度稀释会导致薄而非凝胶的蛋白质层。这可能对细胞附着有用，但在分化研究中可能不太有效。

Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix可以以几种方式使用。薄凝胶法适用于在凝胶表面上培养细胞，厚凝胶法允许您在三维基质中培养细胞，而薄涂层法（无凝胶）则提供了一个复杂的蛋白质层，供您在其上培养细胞。根据您希望实现的最终结果（细胞生长、附着或分化），选择合适的方法。

注意：Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix产品的蛋白质浓度是批次特定的，并在分析证书上提供。为了获得一致的结果，通过计算所需的特定蛋白质浓度（mg/mL）稀释Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix产品。为了保持凝胶的一致性，建议不要将Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix稀释至少于3 mg/mL。使用预冷的无血清培养基进行稀释。通过上下移液或在冰上旋转小瓶来混合。

薄凝胶法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix。使用冷却的吸管，并混合均匀。

●将培养板放在冰上，每平方厘米培养表面加入50 µl的混合液。

●将培养板放置在37°C的细胞培养箱中，孵育30分钟。

●如有必要，在使用前吸去未结合的物质，并用无血清培养基轻轻冲洗（避免吸管的尖端不会刮伤涂层表面）便可使用。

厚凝胶法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix。使用冷却的吸管，并混合均匀。

●将培养板放在冰上。将细胞加入Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix中，并使用冷却的吸管悬浮，每平方厘米培养表面加入150-200 µl。

● 将培养板放置在37°C的细胞培养箱中，孵育30分钟后添加培养基。细胞也可以在这个凝胶上培养。

薄涂层法：

●根据推荐方法解冻Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix。使用冷却的吸管，并混合均匀。

●使用无血清培养基稀释Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix至所需浓度。应进行预实验以确定适用的最佳涂层浓度。

●将稀释后的Corning Matrigel Matrix Basement Membrane Matrix加入要涂层的容器中。数量应足够覆盖整个生长表面。在室温下孵育一小时。

● 吸去未结合的物质，并使用无血清培养基轻轻冲洗，随后便可使用培养板。