【Wako】干细胞研究用CEPT Cocktail

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CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。

研究表明，CEPT可防止人ES/iPS细胞（人多能干细胞；hPSCs）在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤^1）。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似，可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。

此外，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率^1,2,3）。

FUJIFILM Wako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液，可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。

参考文献

1）Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).

2）Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).

3）Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).

特点

● 从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞，维持细胞结构与功能

● 已进行过滤灭菌的即用型混合溶液

● 已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列

测试项目

● 浓度（HPLC）：已通过测试

● 外观：液体

● 内毒素：<3 EU/mL

● 已完成无菌测试

● 已完成支原体阴性测试

使用方法

以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。

※使用注意

● 本产品为冻存品（-20°C）。为避免反复冻融，建议根据使用量分装冻存。

● 溶解时可能会出现沉淀，并非产品质量问题，请直接使用。

（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）

适用范围

样品：人ES/iPS细胞

应用：

性能数据

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO₂的条件下培养人iPS细胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm²）。

培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。

培养第8天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数细胞集落。

单细胞克隆测试

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO₂的条件下培养人iPS细胞201B7株（96孔板）。

培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。

培养第13天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数形成细胞集落的孔数与空孔数。

通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比，计算细胞集落形成率。

【结果】

细胞接种数少时，添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。

未分化人iPS细胞的维持确认

【细胞株】人iPS细胞201B7株

【培养基】StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF

Red：rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）

Blue：DAPI (细胞核染色)

※ BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素

【结果】

添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化维持状态。

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※ 仅供实验研究用，不可用于临床诊断。

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发布日期：2024-04-24 15:12:06
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