【Cytiva】HyrTryp细胞消化液
使用 HyrTryp™ 细胞消化液(图 1)消化和收获细胞。该产品是猪胰蛋白酶的一种无动物源成分 (ADCF) 重组替代物。
HyrTryp™ 可用于基于细胞培养的疫苗生产,以及干细胞、原代细胞和基因治疗工艺中的贴壁细胞消化,例如 MRC-5、Vero和 CHO K-1 细胞系,无论培养过程是否添加血清。您只需用它代替猪胰蛋白酶,不必调整实验方案中的其他条件。
• 法规友好 — 无动物源成分 (ADCF)。
• 无染料 — 不添加酚红。
• 灵活 — 适合多种细胞类型和应用。
• 高效 — 细胞消化速度与标准胰蛋白酶相当。
• 温和 — 不影响细胞的生存能力和倍增时间。
图 1. HyrTryp 细胞消化液
保存限期
当储存在 -20℃ 时,HyrTryp 的保存限期为自生产之日起 12 个月。
使用说明
从培养容器中分离细胞以进行传代培养和扩增:
• 在显微镜下检查细胞,以确保融汇程度达到 60% 至 90% 、细胞形态正常并且没有微生物污染。
• 将 HyrTryp 细胞消化液解冻。
• 使用无菌技术,从培养容器中吸取并弃掉培养基。使用不含钙、镁离子的无菌磷酸盐缓冲液 (PBS) 清洗单层细胞三次。
• 使用无菌技术向培养容器中添加 HyrTryp。我们建议使用剂量为每 75 cm2 的面积 5 到 10 mL,您可以根据您的培养需求调整体积。 轻轻摇动培养容器,使细胞单层被完全浸没。
• 每隔 2 到 3 分钟检查细胞是否消化。根据细胞系的不同,可能需要 5 到 15 分钟才能完全消化。对于某些难以消化的细胞,您可能需要先离心,并在 37℃ 下孵育 5 至 10 分钟,才能使细胞完全消化。
• 中和胰蛋白酶。使用无菌技术,吸取含血清的完全培养基(或大豆胰蛋白酶抑制剂,当您的工艺必须完全符合 ADCF 标准)并添加进培养容器,其体积与所用胰蛋白酶的体积大致相同。上下吹打几次,以冲散细胞团,并冲洗容器的侧面。如果使用大豆胰蛋白酶抑制剂来中和,需要将混合液转移到离心管中,以 100×g 离心约 5 分钟。弃上清,然后将细胞无菌重悬于完全培养基中。 注意:此步骤中确保获得单细胞悬液对于后续传代培养非常重要。
• 像往常一样计数细胞和传代。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
HyrTryp 细胞消化液 | SV30209.01 | 100mL |
HyrTryp 细胞消化液 | SV30209.02 | 500mL |
相关产品 | 货号 | 规格 |
不含钙和镁的 PBS | SH30256.02 SH30256.LS | 1000 mL 6×1000 mL |
Cytodex 1(干粉) | 17044801 17044802 17044803 | 25 g 100 g 500 g |
冷冻保存培养基 | SH30894.01 | 100 mL |
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