【VLVbio】M65® ELISA

【VLVbio】M65® ELISA

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▍▏原理

M65® ELISA检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18(K18),可以整体评估细胞的死亡情况,判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65® ELISA 最初是为了和M30 Apoptosense® ELISA配套使用而设计研发的,后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用,可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。

由于M30 Apoptosense® ELISA 和M65® ELISA 都是用同一标准进行校对的,所以两者配套使用可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。

M65® ELISA可用于检测人血清,并且带有CE认证(可用于体外诊断)


▍▏M65® ELISA特点

● 只特异性定量检测上皮细胞的整体死亡情况

● 与M30 Apoptosense® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。

● 夹心法ELISA检测,采用96孔板和即用型试剂,方便使用。

● 试剂盒可多次拆分使用。

● 肝病学:检测肝病患者肝细胞死亡总数。也可用于检测疑似肝病。

● 肿瘤学:检测上皮癌细胞经化疗后的凋亡情况。

● 毒理学:临床评估不同药物对肝细胞的影响。


▍▏应用

在体内凋亡或者坏死的肿瘤细胞,细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。在细胞 ATP生成不足的情况下,凋亡刺激可能无法诱导凋亡程序的启动,反而导致细胞坏死 (Leist et al., 1997)。细胞坏死期间,未经caspase水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。

角蛋白18(K18)是在多种细胞内高度表达的胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内形成不溶性细丝,但也报道称有部分可溶性K18 (Chou et al., 1993)。细胞死亡时,细胞内K18会释放到细胞外。因此检测细胞外可溶性的K18可反映K18阳性细胞死亡的“过程和原因” (由于细胞凋亡和细胞坏死导致) (Kramer et al., 2004).

K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解, caspase裂解的片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18 (ccK18)与总K18的相对比例反映了细胞凋亡与总细胞死亡的相对比例(不同的 “M30:M65比率”) (Kramer et al., 2004).

M65® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗 ,旨在与 M30 Apoptosense® 检测一起使用,评估人血清中肿瘤细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA特异性检测caspase-cleavage K18 在Asp396形成的新表位 (K18 Asp396-NE, M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒根据同一标准校对,可以计算caspase-cleaved K18和总K18之间的比率 (“M30:M65 比率”)。培养细胞中诱导细胞凋亡会导致caspase-cleaved K18释放,和较高的 M30:M65比率;而诱导细胞坏死,只会导致释放未被切割的K18分子,和较低的M30:M65比率。因此,通过M30:M65比率就可反映出上皮细胞的死亡模式。


▍▏产品信息

特异性:人

样品类型:含有从死亡细胞中释放的K18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin plasma)

灵敏度:11 U/I, Standard A(0 U/L)+2 S.D.

范围:125-2,000 U/L

检测目标物:完整的K18和caspase-cleaved K18

特点:可进行定量检测;预铺ELISA 板(可拆卸)、即用试剂,操作方便;可用于自动化

稀释线性:用M65 Standard A 稀释,平均值是126%(范围116-139%);用血清稀释,平均值是120%(范围101-133%)


▍▏产品列表

产品编号

产品名称

规格

10020

M65® ELISA 

细胞死亡M65® ELISA试剂盒

96 wells


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