【STEMCELL】SepMate™离心管使用说明

【STEMCELL】SepMate™离心管使用说明

SepMate™简介

SepMate™是一种创新型离心管,用于通过密度离心从人全血或骨髓中分离单个核细胞(MNCs,包括淋巴细胞和单核细胞)。

 SepMate™-50

 SepMate™-15


产品信息

产品名称

货号

规格

包装规格

SepMate™-15 (IVD)

85415

15 mL

100管/包

85420

15 mL

500管/包

SepMate™-50 (IVD)

85450

50 mL

100管/包

85460

50 mL

500管/包

产品优势

● 无需在密度梯度培养基(例如Lymphoprep™等)上仔细分层血液

● 仅需 10 分钟即可完成分离程序

● 管内置有独特的插件,可防止密度梯度离心液和血液样本发生混合。只需倒出上清液即可收获分离的单核细胞

● 可与 RosetteSep™ 富集混合物结合使用,在 30 分钟内分离出特定的细胞类型

样品制备

使用适当的抗凝剂采集全血。全血标本可在室温(15 - 25℃)下保存不超过48小时。使用适当的抗凝剂收集骨髓。骨髓标本可在室温下保存不超过48小时。

使用方法

确保样本、含 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS 缓冲液(PBS+2% FBS)、密度梯度离心液以及离心机均处于室温(15-25℃)。

①使用移液器将密度梯度离心液通过 SepMate™插件中央小孔小心加入 SepMate™试管中。密度梯度离心液上端应淹没过插件。

② 使用等体积的 PBS+2% FBS 稀释样本。轻柔混匀。

③ 保持 SepMate™试管垂直,用移液器沿试管壁加入稀释后的样本。样本将会在插件上面与密度梯度离心液混合。样本可以沿管壁直接倒入,但不要直接倒在中央小孔上。

④在室温下 1200 g离心 10 分钟,无需关闭离心机刹车。对于存放超过 24 小时的样本,推荐离心时间为 20 分钟。

⑤倒出上层液体至一个新的试管,该层含富集的 MNCs。请勿将 SepMate™试管在倒置状态下超过 2 秒。(离心后可能会有部分红细胞(RBCs)出现在 SepMate™ 插件的表层,但不会对使用效果产生影响。)

⑥使用 PBS + 2% FBS 清洗 MNCs。重复清洗一次。清洗细胞时建议在室温下 300 g 离心 8 分钟,无需关闭离心机刹车。

产品

起始血液样本(mL)

密度梯度离心液(mL)

SepMate™-15 (IVD)

0.5 - 4.0

4.5

SepMate™-15 (IVD)

> 4 – 5

3.5

SepMate™-50 (IVD)

4 – 17

15


SepMate™-15 :用于处理0.5-5 mL的起始样本。

红细胞压积至少需要0.25 mL。对于红细胞比容较低的血液样本,最小样本体积可能会超过0.5 mL。

红细胞压积的最大体积为3 mL。对于红细胞比容较高的血液样本,最大样本体积可能会少于5 mL。

SepMate™-50:用于处理 4-17 mL的起始样本。

红细胞压积至少需要2 mL。对于红细胞比容较低的血液样本,最小样本体积可能会超过4 mL。

红细胞压积的最大体积为12 mL。因此对于红细胞比容较高的血液样本,最大样本体积可能会少于17 mL。

常见问题

如果离心后插件上的密度梯度离心液出现红色(即部分红细胞未沉降),可以将 SepMate™试管再以 1200 g 离心 10 分钟,无需关闭离心机刹车。这种情况可能发生于存放超过 24 小时的样本。

 血小板的去除操作可以通过使用以下方法之一:

(1)步骤 5 中,倒出前用移液器吸除 MNC 层之上的上清液

(2)步骤 6 中,在其中的一次清洗细胞时,于室温下以 120 g 离心 10 分钟,关闭离心机刹车。

使用提醒

① 仅供专业实验室用户体外诊断使用。不适用于治疗应用。

② SepMate™是一次性使用的。请勿重复使用。

③ 请勿在标签上标明的过期日期之后使用SepMate™试管。

④如果产品或包装损坏或受损,请勿使用SepMate™管。


补充操作方法

与 RosetteSep™抗体混合物一起使用 SepMate™ 

SepMate™ 试管可与 RosetteSep™富集抗体混合物一起使用,从人全血中分选特定的细胞。

①根据 RosetteSep™抗体混合物产品说明书中推荐的抗体添加 量,在全血样本中加入 RosetteSep™ 抗体混合物。

② 在室温(15-25°C)下孵育 10 分钟。

③ 按照 SepMate™使用说明步骤操作。

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